- ¥380 - 3800
- 百奥莱博
- HR0354-LGT
- 北京
- 2025年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
381
- 保质期：
长期
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
提取液RT保存。抑制剂-20℃
- 规格：
100ml
特别提示：包括丽春红染色液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：丽春红染色液
产品货号：HR0354
产品规格：100ml
蛋白提取液对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有较强裂解作用，是经典常用的细胞组织快速裂解液。蛋白提取液得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。蛋白提取液中已含常用磷酸酶抑制剂。
储存条件：提取液室温保存。抑制剂-20℃保存。
有效期：一年。
注意事项：
1．实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。
2．整个过程须保持样品处于低温状态。
使用方法：
A．细胞裂解
1．裂解液制备：每 1ml蛋白提取液中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取5-10×106个细胞，在4℃，1000rpm条件下离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。
3．用冷 PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。
4．每 5×106个细胞中加入500μl冷的裂解液(每106个细胞加100μl蛋白提取液。大约相当于6孔板的每孔加入100μl～150μl，或一个75 cm2培养瓶加1～2ml。裂解液和细胞应充分接触。如果蛋白提取液不足量，细胞裂解效率将会降低)，混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。
5．在 4℃，14000rpm条件下离心15分钟。
6．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
B．组织裂解
1．裂解液制备：每1ml蛋白提取液加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，混匀后置冰上备用。
2．取100mg组织样本剪碎，加入1ml裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
3．将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。
4．将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
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酸纤维素膜（cellulose acetate membrane）上的蛋白的检测。丽春红带负电荷，可以与带正电荷的氨基酸残基结合，同时丽春红也可以与蛋白的非极性区相结合，从而形成红色的条带。丽春红染色的灵敏度不及考马斯亮蓝染色。丽春红对蛋白的染色是可逆的，染色后可以用蒸馏水，PBS或其它适当溶液洗去。因此，蛋白质N端测序时将SDS-PAGE胶上的蛋白转移到PVDF膜，用丽春红染色后将目的条带切下用于测序。注意：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白的检测。使用说明 将PVDF膜、硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜浸没在丽春红染色液
内参调整或问题分析。特别说明：丽春红染色液不适用于尼龙膜上的蛋白检测。操作方法1. 将转印膜浸没在丽春红染色液中，用摇床孵育转印膜 1-30 分钟。2. 取出转印膜，用去离子水冲洗膜直到背景干净（通常不超过 5 分钟），条带清晰，记录结果。染液可以继续用去离子水洗涤完全去除丽春红，进行后续的 WB 检测。
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