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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
422
- 英文名:
4',6-Diamidino-2'-phenylindole
- CAS号:
28718-90-3
- 保质期:
2年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
RT干燥避光
- 规格:
10mg
特别提示:包括细胞核蓝色荧光染料DAPI在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:细胞核蓝色荧光染料DAPI
英文名称:4",6-Diamidino-2"-phenylindole
产品货号:KM0159
产品规格:10mg
本品为DAPI的èr盐酸盐,粉末形式,易溶于水。用于细胞核染色时,推荐工作浓度为0.5-10μg/ml。
DAPI是一种蓝色荧光染料,选择性结合双链DNA的小沟区(优先结合AT富集的DNA)形成稳定的复合物,产生比DAPI约强20倍的荧光。DAPI的最大激发/发射波长为340/488nm,DAPI-DNA复合物的最大激发/发射波长为364/454nm,通常用作荧光显微术、流式细胞术和染色体染色的细胞核复染剂。由于对DNA的高亲和性,DAPI还常常被用在细胞计数、凋亡检测、支原体污染检测、基于DNA内含物的细胞分选,以及高内涵成像分析中的核分割工具。虽然高浓度情况下DAPI能够进入活细胞,但DAPI不具细胞膜渗透性,通常情况用来染固定细胞。对于活细胞染色,Hoechst 33342(货号:KM0013)是一种受欢迎的具细胞膜渗透性的核复染剂。
主要参数:
CAS NO:28718-90-3
分子式:C16H15N5·2HCl
分子量:350.25
纯度:>90%(from N)
溶解性:溶于水(1-5mg/ml)
Ex/Em:340/488nm(DAPI);364/454nm(DAPI-DNA);
结构式:
保存:室温干燥避光保存,2年有效。
使用方法:
一、储存液配制
用双蒸水溶解,配制1-5mg/ml的储存液。-20oC避光保存1年,建议分装保存,避免反复冻融。
注意:本品不可以用缓冲液直接溶解。
二、工作液配制
用双蒸水或PBS稀释母液,配制成所需要的工作浓度(0.5-10μg/ml)。
三、固定的细胞或组织染色
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色,则直接进行DAPI染色。
1.对于贴壁细胞或组织切片:加入适量DAPI染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5min。
2.吸除DAPI染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5min。
3.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=364/454nm。
四、活的细胞或组织染色
1.细胞培养物中加入适量DAPI染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。对于六孔板,一个孔通常需加入1ml染色液;对于96孔板,一个孔通常需加入100μl染色液。
2.在37℃培养细胞10~20min。
3.用PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
4.直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。Ex/Em=364/454nm。
注意事项:
1.DAPI对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2.荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3.为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
我公司销售的细胞核蓝色荧光染料DAPI(28718-90-3)(>90%),DAPIèr盐酸盐质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验RUVKUN Antibody Staining Protocol revised 10/29/90
RUVKUN Antibody Staining Protocol revised 10/29/90 Fixation: 1. C. elegans N2 grown in liquid or plates. Harvest worms. Wash for 2 hours at room temp. in 1X M9 or PBS. 2. Fix in 5 ml of FRESH THAT DAY 1% paraformaldehyde:
(Hoechst 33258), DAPI。三种种染料与DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时用PBS稀释,终浓度为10 ug/ml。DAPI为半通透性,用于常规固定细胞的染色。储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用终浓度一般为10 ug/ml。结果评判:细胞凋亡过程中细胞核染色质的形态学改变分为三期:Ⅰ期的细胞核呈波纹状(rippled)或呈折缝样(creased
2.荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜 一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。 常用的DNA特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258),DAPI。三种染料与 DNA的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA的A-T碱基区。紫外光激发时发射明亮的蓝色荧光。 Hoechst是与DNA特异结合的活性染料,储存液用蒸馏水配成1mg/ml的浓度,使用时
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