腔肠素e(114496-02-5)(>95%)

特别提示：包括腔肠素e在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：腔肠素e
英文名称：Coelenterazine e
产品货号：KM0093
产品规格：500μg|2×500μg

腔肠素e是一种天然腔肠素衍生物，带有一个额外的乙基基团，从而形成一个额外的环形结构，最早由Shimomura进行描述。腔肠素e是一款优秀的海肾荧光素酶（Rluc）底物。腔肠素e产生的荧光接近于CTZ-Native的40%以上，虽然前者的初始荧光强度比后者高7倍多。腔肠素e/海肾荧光素酶的发射光谱有两个峰值，分别为418nm和475nm。

腔肠素e也是一款良好的脱酰基水母发光蛋白（APO）底物，与天然腔肠素相比，腔肠素e形成的水母蛋白复合物具有更快的荧光上升时间，并且呈现两个发射吸收峰（分别在405nm和465nm），吸收峰高度的比值取决于pCa 5-7范围内的钙离子浓度。这一双吸收峰特征使得腔肠素e/APO通过吸收峰强度的比例来测定钙离子成为可能。

主要参数：
CAS NO：114496-02-5
分子式：C28H23N3O3
分子量：449.5g/mol
纯度：>95%
外观：黄色至橙色固体
溶解性：溶于甲chún或乙醇，不要溶于DMSO

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

使用方法：
1．实验前将腔肠素e从冰箱取出回至室温，之后低速离心使得管内固体（或粉末）落到管底。
2．用酸化、脱气体的无水乙醇溶解固体（或粉末），混匀，使其浓度为1mg/ml。
3．最好于实验前才对乙醇储存液进行稀释，再用于所有的鲁米诺分析或实验。根据具体的工作体系选择合适的水溶性缓冲液对乙醇储存液进行稀释。（比如，100μM用于荧光计分析）
4．将未用完的腔肠素e溶液保存在-80℃，尽快用完。不可将水溶性工作液进行保存（会被氧化从而降解）。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

产品名称	货号	Em(nm)	RLC1①	Relative Intensity②	Half-rise time(ms)③
天然腔肠素	KM0051	466	1	1	6-30
腔肠素h	KM0097	466	0.75	16	6-30
腔肠素400 a	KM0094	400	/	/	/
腔肠素hcp	KM0091	445	0.65	500	2-5
腔肠素cp	KM0090	442	0.63	28	2-5
腔肠素f	KM0092	472	0.8	20	6-30
腔肠素n	KM0089	468	0.25	0.15	6-30
腔肠素e	KM0093	405?& 465	0.5	4	0.15-0.3

①RLC = relative luminescence capacity:Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+relative to native aequorin = 1.0.
②Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca2+.
③Half-Rise Time:The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50%of the maximum after addition of 1mMCa2+to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest.

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称	货号	应用特征
天然腔肠素	KM0051	应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团，也是海肾荧光素酶的底物。底物的快速再生比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。 1）生物发光检测钙离子的灵敏度非常高，检测范围从0.1μM到＞100μM； 2）使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用； 3）其他应用包括生物共振能量转移BRET，化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)。
腔肠素h	KM0097	1）腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上； 2）比天然腔肠素对钙离子敏感度更高； 3）也适用报告基因分析。
腔肠素400 a	KM0094	也称为DeepBlue C，是一种腔肠素衍生物，用作海肾荧光素酶Rluc的底物，发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的shǒu选底物，因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
腔肠素hcp	KM0091	其生物发光强度最高（腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍），对Ca2+反应速度快。
腔肠素cp	KM0090	腔肠素cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍，且具有更快的Ca2+反应性。
腔肠素f	KM0092	腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍，最大发射波长约长8nm。具有较好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物，建议用腔肠素f。
腔肠素n	KM0089	所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱，对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
腔肠素e	KM0093	体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高，具有双发射峰，分别为405nm和465nm，使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度，提高检测准确度。但由于渗透性差，不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。

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