镁离子荧光探针(Mag-Fluo-4 AM)(≥90%)

特别提示：包括镁离子荧光探针(Mag-Fluo-4 AM)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：镁离子荧光探针(Mag-Fluo-4 AM)
英文名称：Mag-Fluo-4 acetoxymethyl ester,cell permeant
产品货号：KM0006
产品规格：2×50μg|10×50μg

具细胞膜渗透性的Mag-Fluo-4 AM是Fluo-4 AM（货号：KM0172-50UG）的一种结构类似物，对镁离子（Mg2+）和钙离子（Ca2+）的Kd值分别是4.7mM和22μM，是一种非常有用的细胞内镁离子指示剂和低亲和性钙离子指示剂。

镁离子指示探针
Mag-Fluo-4具更加灵敏的Mg2+荧光反应。由于细胞内Mg2+的生理波动幅度通常很小，这一点点灵敏度的提高都是值得考虑的优势。与Fluo-4一样，Mag-Fluo-4在不含二价阳离子的情况下基本无荧光，一旦与Mg2+结合后，呈明显的荧光加强，但无光谱迁移（见下图）。

Mag-Fluo-4在0-50mM Mg2+溶液内的荧光发射光谱

钙离子指示探针
Mag-Fluo-4是Fluo-4的类似物，具有更低钙离子结合亲和性，特别适合用于检测1μM~1 mM范围内的胞内钙离子水平。

分子式：C37H33F2NO18
分子量：817.65g/mol
外观：橙色固体
纯度：≥90%
Ex/Em：494/516nm
溶解性：溶于DMSO
保存：-20oC干燥避光保存，至少一年有效。

使用方法：

一、储存液制备
取一管低温保存的Mag-Fluo-4 AM，置于室温回温至少20min。之后加入高质量无水DMSO配制成1~5mM储存液，比如50μgMag-Fluo-4 AM（Mw：817.65 g/mol）溶于12μlDMSO，充分溶解后，即得到5mM储存液。
注意：未使用的储存液分装储存在-20℃，避免反复冻融，且要避光保存。尽快使用完。

二、操作步骤
注意：以下使用方法仅作参考，需根据具体的细胞类型和实验要求做出调整。加载温度范围是RT~37℃，更高温度会提高加载速度，但更低温度能最小化染料的内在化现象。表面活性剂Pluronic F-127有时加入能促进AM探针在水溶性缓冲液内的均匀分散。
1．在所需温度（25℃~37℃）预孵育细胞10min，使其离子梯度达到稳定和平衡。
2．取4μl Mag-Fluo-4 AM储存液和5μl 20%Pluronic F-127，加入1ml细胞培养液，剧烈漩涡混匀得到均匀的探针分散液。
3．取250μl上述制备的探针分散液加入750μl含细胞的培养基内，混匀，此时得到终浓度为1~5μM的工作液，根据起始母液浓度来确定。
4．根据需求探针孵育15~60min。
5．细胞清洗3次，之后继续孵育30min以保证细胞内的探针完全去酯化。之后选择合适的仪器，进行荧光测定。

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