注射用天然腔肠素北京厂家

特别提示：包括注射用天然腔肠素在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：注射用天然腔肠素
英文名称：Injectable native Coelenterazine
产品货号：KM0097
产品规格：2×500μg|20×500μg

天然腔肠素是自然界中存在最丰富的一种腔肠素，也是目前应用最普遍的一种标准底物。不仅是天然水母发光蛋白复合物的发光基团，也是海肾荧光素酶（Rluc）和分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）等的作用底物。还可用于生物共振能量转移BRET，细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平（ROS）的化学发光检测。

本品为专供体内成像研究的注射用天然腔肠素，不仅含有超纯的天然腔肠素（＞99%），还提供特别设计的Inject-Diluent溶剂，能够最大程度的溶解腔肠素，从而最小化体内注射体积。另外，与传统乙醇溶解的腔肠素相比，用Inject-Diluent溶解的腔肠素能得到更好的荧光信号。

产品组成：

组分	2×500μg	20×500μg
天然腔肠素	2×500μg	20×500μg
Inject-Diluent	500μL	10×500μL

保存：-20℃干燥避光保存，且保存于惰性气体内。至少一年有效。

操作步骤：
1．使用装有23 gauge或更小针头的0.5-1.0ml注射器，吸取150μl温热（35-50℃）的Inject-Diluent。
2．将150μl Inject-Diluent打入天然腔肠素瓶内，使用针头和注射器上下吸打或低速涡旋，直至看到完全透明溶液，此时得到腔肠素溶液浓度为3.33mg/ml。如果溶液没有完全透明，用水浴锅或加热板在60-80℃加热几分钟，检查完全透明。
3．按下表，用胰岛素注射器吸取15-75μl充分溶解的腔肠素溶液（3.33mg/ml），通过尾静脉注射到动物体内。检查，排气，冲洗针头。使用胰岛素注射器的优势在于很低的液体滞留体积（＜2μl）。缓慢注射。

建议按照下表单只小鼠（25g体重）的腔肠素溶液（3.33mg/ml）注射剂量表

需要的底物质量	腔肠素h溶液注射体积
50μg	15μl
100μg	30μl
200μg	60μl
250μg	75μl

注意：分泌型膜锚定荧光素酶（Gluc）比其他荧光素酶强许多倍，具有更高的Km值，因此需要更多的腔肠素底物来达到理想的信号值。天然腔肠素是唯一的底物能用于分泌型膜锚定荧光素酶。建议每只25g体重的小鼠，使用100-200μg腔肠素。往每只25g小鼠内注射的液体量不要超过70-80μl。若需要更高底物，可提高腔肠素溶液的浓度。

附录1天然腔肠素及其衍生物的光谱特性

产品名称	货号	Em(nm)	RLC1①	Relative Intensity②	Half-rise time(ms)③
天然腔肠素	KM0051	466	1	1	6-30
腔肠素h	KM0097	466	0.75	16	6-30
腔肠素400 a	KM0094	400	/	/	/
腔肠素hcp	KM0091	445	0.65	500	2-5
腔肠素cp	KM0090	442	0.63	28	2-5
腔肠素f	KM0092	472	0.8	20	6-30
腔肠素n	KM0089	468	0.25	0.15	6-30
腔肠素e	KM0093	405?& 465	0.5	4	0.15-0.3

①RLC = relative luminescence capacity:Total time-integrated emission of aequorin in saturating Ca2+relative to native aequorin = 1.0.
②Ratio of the luminescence of aequorin reconstituted with coelenterazine analog relative to native aequorin at 100 nM Ca2+.
③Half-Rise Time:The half-rise time is the time for the luminescence signal to reach 50%of the maximum after addition of 1mMCa2+to a standard of aequorin reconstituted with the coelenterazine analog of interest.

附录2天然腔肠素及其衍生物的应用差异

产品名称	货号	应用特征
天然腔肠素	KM0051	应用非常广泛的标准底物。腔肠素是天然水母发光蛋白复合物的发光基团，也是海肾荧光素酶的底物。底物的快速再生比较重要的实验推荐使用天然腔肠素。 1）生物发光检测钙离子的灵敏度非常高，检测范围从0.1μM到＞100μM； 2）使用腔肠素监测报告基因表达是其主要应用； 3）其他应用包括生物共振能量转移BRET，化学发光检测细胞或组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子水平(ROS)。
腔肠素h	KM0097	1）腔肠素h形成的水母发光蛋白复合物比天然腔肠素复合物的光强度高10倍以上； 2）比天然腔肠素对钙离子敏感度更高； 3）也适用报告基因分析。
腔肠素400 a	KM0094	也称为DeepBlue C，是一种腔肠素衍生物，用作海肾荧光素酶Rluc的底物，发射峰约400nm。含GFP受体的BRET研究是Rluc的shǒu选底物，因其对GFP受体的发射波干扰非常小。不可用作Gluc底物。
腔肠素hcp	KM0091	其生物发光强度最高（腔肠素hcp形成水母发光蛋白复合物的荧光强度比天然腔肠素复合物高190倍），对Ca2+反应速度快。
腔肠素cp	KM0090	腔肠素cp产生水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的15倍，且具有更快的Ca2+反应性。
腔肠素f	KM0092	腔肠素f形成的水母发光蛋白复合物的光强度是天然腔肠素复合物的20倍，最大发射波长约长8nm。具有较好的细胞渗透性。当需要具极高钙离子Ca2+灵敏度的水母发光蛋白复合物，建议用腔肠素f。
腔肠素n	KM0089	所有的腔肠素衍生物中荧光强度最弱，对Ca2+反应时间明显慢于天然腔肠素。一种非常有用的低灵敏腔肠素。
腔肠素e	KM0093	体外水母发光蛋白再生中腔肠素e的速度最高，具有双发射峰，分别为405nm和465nm，使其能在pCa 5-7范围内通过双发射峰荧光强度比率的方式测定Ca2+浓度，提高检测准确度。但由于渗透性差，不适合胞内应用。在溶液中稳定性差。

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