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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pMD-19T-CD45
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pMD-19T-CD45/ pMD-19T-CD45质粒
pMD-19T-CD45 Plasmid
Catalog No. PVTB00057
Vector Backbone pMD19-T
Backbone manufacturer TaKaRa
Vector type Cloning Vector
Backbone size w/o insert 2692bp
Cloning site 5 None
Site destroyed during cloning None
Cloning site 3 None
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain DH5alpha
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers None
Background Full length cDNA clone of Homo sapiens protein tyrosine phosphatase, receptor type C
Gene Information
Alternative Gene Name PTPRC; LCA; LY5; B220; CD45; L-CA; T200; CD45R; GP180
Insert Gene name CD45
Insert size 1200bp
Accessions NM_002838.4
Tag None
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 5788
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文献和实验从单个小鼠肿瘤样本中分选高纯度、高活性 TIL 细胞亚群的完整工作流程
细胞首先通过 CD45 磁珠和 autoMACS®全自动磁性细胞分选仪 被分离出来。 3. 流式细胞分选 MACSQuant® Tyto® 是配备三个激光器的台式流式细胞分选仪,可实现多参数分选,并提供分选 TIL 亚群所需的灵活性。使用 MACSQuant Tyto,通过对同一样本的两轮分选,从 CD45+TIL 细胞中分选出两个 TIL 细胞亚群:第一类(NK 细胞):CD45+CD11b-, 抗 NKp46+;第二类(B 细胞):CD45+CD11b-,抗 NKp46-, CD19
、CD14-PE、CD19-PE、CD3-PE、CD66b-PE、CD56-PE-Cy7、CD11c-APC、 CD45-AF700、CD38-APC-AF750(每次测试 5μL),以及 CD16-FITC(每次测试 20 μL),并在冰上孵育 30 分钟。10. 在 4℃ 条件下,300 x G 离心细胞 5 分钟。11. 吸取上清液。12. 重悬到 500 μL 染色缓冲液中。13. 通过 CytoFLEX 获取结果。通过 CytoFLEX 进行数据采集:1. 创建新补偿值。2. 如适用
细胞类型中,相应抗原的表达量,可以粗略地将抗原分子分为三类: 1. 很容易鉴定、容易区分阴阳性细胞群、阴阳性峰明显分开的抗原。例如:CD3,CD4,CD19 等。 2. 很容易鉴定、较高水平表达、经常连续性表达。例如:CD27,CD28,CD45RA, CD45RO 等。 3. 低水平表达、激活性 Marker、未知但关键。例如:CD25,STAT5,Foxp3 等。 表达量的强弱,可以参考厂家的质检结果,但更多地需要参考文献里具体细胞群体的表达。 第三步、了解实验所用流式细胞仪的配置
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