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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pCDEF-HA-Ub-K11R
- 库存:
50
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pCDEF-HA-Ub-K11R
Catalog No. PVT10380
Packing 2ug
pCDEF-HA-Ub-K11R Information
Function ORF expression plasmid
Resistance Amp
Screen /
Strain DH5alpha
Culture temperature 37degrees centigrade
pCDEF-HA-Ub-K11R Description
PCDEF-HA-Ub-K11R plasmid is an expression plasmid of mammalian cells. The prokaryotic resistance is Amp (ampicillin). It is mainly used to express Ub gene in mammalian cells and its related research.
1, there are 7 lysine in the Ub gene, which are sixth, 11, 27, 29, 33, 48, 63. The pCDEF-HA-Ub-K11R plasmids only turn eleventh lysine into arginine and retain the remaining six lysine, which can be used to study which site of the Ub chain.
2, the pCDEF carrier is constructed with pCDEF-HA-N
3, the original sequence of the UbC gene:
ATGCAAATCTTCGTGAAGACACTCACTGGCAAGACCATCACCCTTGAGGTCGAGCCCAGTGACACTATCGAGAACGTCAAAGCAAAGATCCAAGACAAGGAAGGCATTCCTCCTGACCAGCAGAGGTTGATCTTTGCCGGAAAGCAGCTGGAAGATGGGCGCACCCTGTCTGACTACAACATCCAGAAAGAGTCTACCCTGCACCTGGTGCTCCGTCTCAGAGGTGGGTGA
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文献和实验大肠杆菌亮氨酰-tRNA合成酶E292对于氨基酰化活性的作用
双酶切后,嵌入表达载体pTrc-99B的NcoI和HindIII两个酶切位点间的切口内。得到的LeuRS 6个变种酶基因的正确性用DNA测序证实。 2. LeuRS及其变种酶基因的表达和纯化 1) 将含有LeuRS及其六个变种酶LeuRS-E292K,LeuRS-E292F,LeuRS-E292S,LeuRS-E292D,LeuRS-E292Q,LeuRS-E292A的基因的重组质粒转化到在大肠杆菌菌株TG1中,挑选含有正确质粒的转化子至5 mL氨节
因子,使TH2型反应向TH1型反应转变。因此称之为“免疫刺激DNA序列”(ISS)。ISS的精确序列及在质粒中所处位置对DNA免疫都有影响。含CpG的免疫刺激序列不仅能增强DNA的免疫,还能直接增强蛋白质的免疫。1998年,Lee等对CpGDNA的佐剂效应作深入的研究可证实这点:当用95ug的质粒载体pCIN(含ISS)和5ug表达流感病毒凝集素(HA)的质粒pCIN HA共注射小鼠后,得到的CTL效应和T细胞增殖率比单注射5ug或100ug的pCINHA高,特异性IgG与注 射100ug
刺激DNA序列”(ISS)。ISS的精确序列及在质粒中所处位置对DNA免疫都有影响。含CpG的免疫刺激序列不仅能增强DNA的免疫,还能直接增强蛋白质的免疫。1998年,Lee等对CpGDNA的佐剂效应作深入的研究可证实这点:当用95ug的质粒载体pCIN(含ISS)和5ug表达流感病毒凝集素(HA)的质粒pCIN HA共注射小鼠后,得到的CTL效应和T细胞增殖率比单注射5ug或100ug的pCINHA高,特异性IgG与注 射100ug的pCINHA相当。但IgG2a/IgG1较低,抗体谱仍以IgG
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