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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pcDNA3.1(+)-Flag-GSTP1(P123D)
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pcDNA3.1(+)-Flag-GSTP1(P123D) Plasmid
Catalog No. PVTB01107-2c
Vector Backbone pcDNA3.1(+)
Backbone manufacturer Invitrogen
Vector type Mammalian Expression
Backbone size w/o insert 5428bp
Cloning site 5 Kpn I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 Xho I
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain Top10
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers Neomycin
Background Mammalian Expression vector of Homo sapiens glutathione S-transferase pi 1(one point mutation P123D) with N terminal Flag tag
Gene Information
Alternative Gene Name DFN7; FAEES3; GST3; GSTP; HEL-S-22; PI
Insert Gene name GSTP1(P123D)
Insert size 633bp
Accessions NM_000852.3
Tag Flag(N-term)
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 2950
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文献和实验浅析染色质免疫沉淀(ChIP)技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性
染色质免疫沉淀(ChIP)是研究蛋白质-DNA 相互作用的一项强大技术,广泛用于多个领域的染色质相关蛋白的研究(如组蛋白及其异构体,转录因子等),特别适用于已知启动子序列或整个基因位点的组蛋白修饰分析研究。这项技术采用特定抗体来富集存在组蛋白修饰或者转录调控的 DNA 片段,通过多种下游检测技术(定量 PCR ,芯片,测序等)来检测此富集片段的 DNA 序列。 ChIP 技术自诞生之后,已成功的应用于人或动物细胞和组织 [1] 、植物组织 [2] 、酵母 [3] 以及细菌、质粒
和EcoRI消化去除OriP片段,T 连接酶连接,构建得到重组质粒载体pcDNA3-EGFP-EBNA1MAR。 质粒纯化和鉴定 所得质粒按质粒纯化试剂盒要求进行抽提纯化。测定光密度值(D260nm ),鉴定质粒的量和纯度,酶切,电泳鉴定。 细胞转染 细胞株COS-7在含10% 小牛血清的DMEM培养液、5%CO 、37℃ 恒温箱中培养。用阳离子脂质体Lipofectamine 2000介导质粒pcDNA3-EGFP.EBVR和pcDNA3.EGFP.EBNA1.MAR转染
肝脏组织中表达人甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin,MBL)。方法:采用PCR方法从pGEMT-MBL质粒中扩增人MBLcDNA序列,克隆人pUC19载体中,限制性酶切鉴定及测序正确后,将MBLcDNA克隆人真核表达载体pcDNA3质粒中,构建成pcDNA3-MBL质粒,经尾静脉大容量快速注射pcDNA3-MBL质粒20μg,8h后处死小鼠,Western Blot方法检测小鼠肝脏组织和血清中人MBL,免疫组织化学方法检测小鼠肝脏组织中人MBL的表达情况。结果:成功扩增出
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