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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
负20摄氏度
- 保质期:
3个月
- 英文名:
pGEX-4T-1-SUV420H2(2-280aa)
- 库存:
100
- 供应商:
LSMBIO
- 规格:
2ug
pGEX-4T-1-SUV420H2(2-280aa) Plasmid
Catalog No. PVTB00945-1a
Vector Backbone pGEX-4T-1
Backbone manufacturer GE
Vector type E. coli Expression
Backbone size w/o insert 4969bp
Cloning site 5 EcoR I
Site destroyed during cloning NO
Cloning site 3 Xho I
Bacterial resistance Ampicillin
Growth strain Top10
Growth temperature 37 Centigrade
High or low copy High Copy
Selectable markers None
Background E. coli Expression vector of Homo sapiens lysine methyltransferase 5C(2-280aa) with N terminal GST tag
Gene Information
Alternative Gene Name KMT5C; Suv4-20h2
Insert Gene name SUV420H2(2-280aa)
Insert size 837bp
Accessions BC044889
Tag GST(N-term)
Species Homo sapiens (human)
Gene ID 84787
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文献和实验450μl的苯酚/氯仿/异戊醇,振荡混匀, 4℃离心。12000g ×10min。⑦小心移出上清于一新Eppendorf管中,加入2 /3倍体积异丙醇,混匀, 4℃离心12000g×5min。⑧1. 0ml预冷的70%乙醇洗涤沉淀1 ~2次,沉淀在室温下晾干。⑨沉淀溶于50μlTE (含RNaseA 20μg/ml) , 37℃水浴30min 以降解RNA 分子, - 20℃保存备用。1. 2. 2 质粒DNA 的定量及杂质检测 各取样品10μl释稀200 倍后,分别测定OD260 和OD280
【求助】将报告基因质粒转染到癌细胞中,是否都要共转染一个带有抗性基因的质粒来筛选阳性克隆?
lsdcfhyj 很感谢xdb86的回答,让我弄懂了一直困惑的问题,只是我说的挑选阳性克隆,是因为我需要建立一个含报告基因的稳定的细胞系,用于后续的研究。我还有个问题,在感受态细胞中扩增出质粒,那我如何知道提出的质粒的量呢?谢谢 xdb86 用核酸分析仪测定DNA含量(OD260,OD280),就代表质粒的量。 lsdcfhyj 谢谢了 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫
醇,室温下放置5分钟;9.12000 g 常温离心15分钟;10.倒尽上清,加75%乙醇浸洗除盐(放置片刻或离心3分钟后倒去上清);11.室温放置或超净台上风干DNA;12.加40 ml灭菌超纯水或TE溶解;13.质粒、BAC的质量检测,于-20℃保存。附注:质粒检测电泳检测:质粒电泳一般有三条带,分别为质粒的超螺旋、开环、线型三种构型吸光值检测:采用分光光度计检测260nm、280nm波长吸光值,若吸光值260nm/280nm的比值介于1.7-1.9之间,说明质粒质量较好,1.8为最佳,低于
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