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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
Cytiva
- 规格:
300MMx4M 1/PK
1、性价比高,采用超大规格的膜,30cm*4m,每卷可以使用更久,每平方厘米单价更便宜;
2、质量优异,蛋白结合力高(>200μg/cm2),背景低,可反复剥离;
3、可快速赔付:产品使用过程中出现问题我们会24h内给您回复,如果是产品质量问题两周内给您赔付。
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文献和实验减小,膜对低分子量蛋白的结合就越牢固。 通常用 0.45μ m 和 0.2μm 两种规格的 NC 膜。 大于20kD 的蛋白可用 0.45μm 的膜, 小于 20kD的蛋白就要用 0.2μ m 的膜了, 如用0.45μ m 的膜就会发生“Blowthrough”的现象。PVDF 膜灵敏度、分辨率和蛋白亲和力比常规的膜要高,非常适合于低 分子量蛋白的检测。但 PVDF 膜在使用之前必需用纯甲醇浸泡饱和 1-5 秒钟。 蛋白质常用的转移方法主要有两种:槽式湿转和半干转移。前者操作容易
):BDNF(28 KDa)、Bactin(42 KDa)、LaminB(72 KDa),以及磷酸化蛋白(保密 43 KDa) WB用膜类型、孔径:PVDF(0.45)膜 转膜方式(恒压、恒流):300 mA 恒流 转膜时间:60 min 转膜设备:湿转 Bio-Rad Mini 转膜缓冲液:25%甲醛 觉得这个浓度的甲醛可以有效降低电转的热量,而且使膜对蛋白的吸附效果较好,Marker转到膜上很鲜艳。 用立春红染色效果也很好。 蛋白来源
。我们推荐按照制造商的说明进行操作。应使用还原型凝胶,除非抗体数据表中推荐使用非还原性条件。凝胶百分比取决于蛋白质的大小:4~40 kDa12~45 kDa10~70 kDa15~100 kDa25~200 kDa20%15%12.5%10%8%四、将蛋白质从凝胶转移到膜上如下制备转移堆叠体:膜可以是硝酸纤维素或 PVDF,两者各具优点。用甲醇「活化」PVDF 1 分钟,并在制备堆叠体之前用转膜缓冲液冲洗 PVDF。可能需要对时间和电压进行一些优化。我们推荐按照制造商的说明进行操作。可在封闭步骤之前
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