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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
429
- 英文名:
EZ-Block A in PBS Solution
- 保质期:
长期
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
冷藏(2-8℃)
- 规格:
100mL|500mL
特别提示:包括WB封闭液在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:WB封闭液
英文名称:EZ-Block A in PBS Solution
产品货号:GS4338
产品规格:100mL|500mL
储存条件:冷藏(2-8℃)
概述
A blocking buffer optimized for blocking non-specific binding sites on positively charged nylon or PVDF membranes in nucleic acids or protein blotting applications.
特点
- Advantages:(1)Lower background;(2)High sensitivity and specificity,simple procedure.Incubate the membranes in the BIO-BLOCK solution(about 2ml/cm2)of membrane at 37℃ for 15~30minutesand rinse.
组份
0.5%Hammarsten Casein in 1 x PBS
我公司销售的WB封闭液报价,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验奶粉封闭,就会背景脏得不得了。还有一点就是脱脂奶粉的 IgG 能和抗山羊的二抗有交叉反应……所以……第二种封闭液就是 BSA,这个相对来说贵一些,一般会用于一些磷酸化的 WB 里。但是,有些 BSA 偶联的多肽要做 WB 的话,就绝对不能用 BSA 作为封闭液。第三种封闭液估计你们不会特别常用,其实就是吉利丁,做过布丁或者慕斯蛋糕的同学可能知道这是啥。其实就是 Fish Gelatin,鱼明胶,但是这种封闭液成分价钱很傲娇,所以平时没什么人会使用这个。还有一种比较常用的封闭液,就是 0.25 - 2%
① 膜封闭时间不够,室温下通常摇床孵育膜 1h,出现这种情况可以更换合适的封闭液或者适当延长封闭的时间; ② 抗原抗体免疫过程中一抗稀释度太高,可以多设置几组一抗浓度,摸索最适宜的抗体稀释度; ③ 在整个实验过程中膜发生干燥或手套反复接触过也会发生背景值高的情况,因此实验过程中要注意保持膜的湿润,使用镊子夹取膜。 3、WB 结果中有杂带干扰 ① 抗体纯度不高会产生非特异性条带影响结果,高纯度抗体条带特异性更好,建议更换抗体; ② 一抗浓度过高,降低一抗稀释比,目的条带和杂带可能会减弱
、转膜由于凝胶太脆难以进行抗体与蛋白的自由结合及检测、显影等操作,故需转膜。目前常用 NC 膜(硝化纤维膜)、PVDF 膜(聚偏二氟乙烯膜)。通过电转移法即将电场加于凝胶 —— 使蛋白移出并附着在薄膜上。除此之外,为了防止过热导致转膜板夹层中形成气泡,故转膜时应该置于冰槽中,且注意将冰块置于黑板所在处。四、封闭与一抗孵育因为用于 WB 的膜对蛋白包括抗体具有高度亲和力,故加抗体前可通过封闭→减少非特异性抗体与膜结合,毕竟封闭剂内的蛋白可覆盖膜上尚未结合蛋白的区域。然后再将膜置于封闭液和能特异性识别
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