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Annexin V-APC染色
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12个月
Annexin V-APC
武汉益普生物科技有限公司
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50T/100T/200T/500T
Annexin V-APC染色液用于鉴定凋亡和坏死细胞。 Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记荧光染料APC利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 Annexin V搭配碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或7-AAD等DNA染色液使用,可区分处于不同凋亡时期的细胞。 Annexin V搭配7-AAD检测喜树碱诱导的Jurkat细胞凋亡效果如下图所示:
实验操作指南步骤: 1. 细胞按照实验方案进行凋亡诱导,300g离心5min,弃上清,收集细胞,PBS洗涤一次,轻轻重悬细胞并计数。 注:本品仅在悬浮培养的细胞中验证,良好的细胞状态是实验的关键。贴壁生长的细胞用于凋亡检测时,可能会因为胰酶消化、吹打等处理导致细胞的坏死或凋亡,对实验结果可能存在不可控的影响,请谨慎处理。 2. 取1-5×10^5重悬的细胞,300g离心5min,弃上清。用PBS洗涤细胞一次,离心后弃上清,加入500μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer工作液重悬细胞。 3. 细胞悬液中加入5μL的Annexin V-APC染色液和5μL的细胞核DNA染色液。 4. 轻柔涡旋混匀后,室温避光孵育15-20min。 5. 反应完成后立即上机检测。如不能及时检测,请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。
保存条件: 4℃可保存1年;Annexin V-APC染色液需要避光保存。
注意事项: 1. 为获得最佳的使用效果,请在3-6个月内使用,Annexin V-APC禁止冷冻保存; 2. 染色后宜尽快检测,时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加; 3. 荧光物质均易发生淬灭,进行荧光观察时,尽量缩短观察时间,操作和存放过程尽量注意避光保存; 4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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