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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
一年
- 保存条件:
2-8℃避光保存
- 规格:
500T/1000T
| 规格: | 500T | 产品价格: | ¥800.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1000T | 产品价格: | ¥1480.0 |
细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒是应用新型的氧化还原指示剂阿尔玛蓝快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。
AlamarBlu是一种氧化还原指示剂,能根据代谢活性产生吸光度变化和荧光信号。其在氧化状态下呈现紫蓝色无荧光性,而在还原状态下,转变为呈粉红或红色荧光的还原产物,其吸收峰为530-560nm,而散射峰为590nm。在细胞增殖过程中,细胞内NADPH/NADP、 FADH/FAD、 FMNH/FMN和NADH/NAD的比值升高,处于还原环境。摄入细胞内的染料被这些代谢中间体及细胞色素类还原后释放到细胞外并溶于培养基中,使培养基从无荧光的靛青蓝变成有荧光的粉红色。最后用普通分光光度计或荧光光度计进行检测,吸光度和荧光强度与活性细胞数成正比。这种染料经过验证安全无毒,用于细胞活性和细胞增殖的定量分析以及细胞因子生物测定和体外细胞毒性研究。 这种测定是基于具有代谢活性的细胞将试剂转换成荧光和比色指示剂的能力。 受损和无活性细胞具有较低的天然代谢活性,因此对应的信号较低。 AlamarBlu的无毒特性使细胞可长期暴露于这种染料,因此可随时间进行测量或进行终点测量。
检测方法:
- 在 530-560 nm 激发,在 590 nm 发射荧光
- 在 570 nm 和 600 nm用分光光度计测定光吸收
使用方法:
细胞活性、细胞增殖-毒性检测
- 细胞的增殖和细胞毒实验,一般可在96孔细胞培养板中进行。
- 每孔加入100微升细胞悬液。细胞的数量取决于实验目的和培养时间。增殖实验每孔通常加入103个以上数量的细胞;细胞毒性实验每孔至少加入5x103个或以上数量的细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等因素确定)。
- 接种的细胞按照实验需要,送入细胞培养箱进行培养。增殖实验通常要给予0-10微升特定的药物或生长因子进行刺激。细胞毒实验通常要给予0-10微升抑制因子或细胞毒药物;
- 培养结束后,取出阿尔玛蓝试剂,置室温融化混匀,于洁净工作台内按10微升/孔加入微孔板中,在细胞培养箱内继续孵育12-24小时,培养液颜色由蓝变为粉红(如采用荧光分光光度法,只需孵育2-8小时);
- 在570nm测定吸光度,参考波长600nm。如无此滤光片, 可用565 nm 和 610 nm的滤光片替代。
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文献和实验简介 细胞增殖/细胞毒性测定是涉及培养细胞的研究中最常用的测试之一。 其是检查用于治疗的药物浓度的基本初步测试,也是确定各种研究领域(如肿瘤学和细胞死亡)药物疗效和安全性的非常重要的测试。 传统上,WST-8 或 ATP 检测(使用代谢活性作为指标)和 BrdU 或胸腺嘧啶核苷检测(使用 DNA 合成水平作为指标)已用于细胞生长特性的定量评估。 尽管这些检测由于其简易性和吞吐量而对我们有益,但这些检测都是间接评估方法,因此结果可能与实际细胞数无关。 在许多情况下,这些检测是终点评估,有时会
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
CCK 试剂盒,为 MTT 法的替代方法,是一种基于 WST(水溶性四唑盐,化学名:2 -(2 - 甲氧基 - 4 - 硝苯基)- 3 -(4 - 硝苯基)- 5 -(2,4 - 二磺基苯)- 2H - 四唑单钠盐)的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。CCK 法与其它检测方法之间的比较
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