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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
一年
- 保存条件:
2-8℃避光保存。长期不用的分装后于-20℃避光保存,避免反复冻融
- 规格:
500T/1000T
| 规格: | 500T | 产品价格: | ¥880.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1000T | 产品价格: | ¥1520.0 |
MTS细胞增殖与毒性检测试剂盒是应用新型的水溶性甲臢化合物[3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲酯基)-2-(4-磺苯基)-2H-四唑(金翁),内盐;MTS]快速高灵敏度检测细胞增殖和细胞毒性的比色检测产品。
MTS被细胞生物还原成一种可溶于组织培养基的甲臢化合物,新陈代谢活跃的活细胞内的脱氢酶类将MTS转化成液态可溶的甲臢化合物,这种甲臢化合物在490nm的吸收值可以直接在96孔板上测量,而不需要另外作处理。由490nm测量的吸收值所表示的甲臢产物的数量与培养物中活性细胞的数量成正比。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数量呈线性关系。
MTS溶液可以直接加入到细胞样品中,不需要预配各种成分,MTS溶液很稳定,对细胞没有毒性,可以长时间孵育细胞。MTS法测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的灵敏度高,无放射性,检测细胞增殖实验的灵敏度比其它方法如MTT, XTT和WST-1高。
www.sabbiotech.com
活性测定使用方法:
1、收集细胞,加细胞悬液100ul(约5000-10000个细胞)到96孔板(边缘孔用无菌水或PBS填充)。每板设对照(加100ml培养基)。
2、置37℃,5% CO2孵育过夜,倒置显微镜下观察。
3、每孔加入10 ul 待检测药物溶液, 37℃孵育。
4、每孔加入10 ul MTS溶液,37℃孵育1-4 小时。
5、测定490 nm各孔的吸光值。
5、同时设置空白孔(培养基和MTS溶液,无细胞),对照孔(不加药培养基和MTS溶液,有细胞),每组设定3-5复孔。
结果分析 :
细胞活力计算:
将各测试孔的OD值减去调零孔OD值或对照孔OD值。各重复孔的OD值取平均数。
细胞活力% =(加药细胞OD-空白OD/对照细胞OD-空白OD)×100
数量测定使用方法:
1、先用细胞计数板计数所制备的细胞悬液中的细胞数量,然后接种细胞。
2、按比例 (例如:1/2比例) 依次用培养基等比稀释成一个细胞浓度梯度,一般要做3-5个细胞浓度梯度,每组3-6个复孔。
3、接种后培养2-4小时使细胞贴壁,然后加MTS试剂培养一定时间后测定O.D值,制作出一条以细胞数量为横坐标 (X轴),O.D值为纵坐标 (Y轴) 的标准曲线。根据此标准曲线可以测定出未知样品的细胞数量 (使用此标准曲线的前提条件是实验的条件要一致,便于确定细胞的接种数量以及加入MTS后的培养时间)。
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文献和实验简介 细胞增殖/细胞毒性测定是涉及培养细胞的研究中最常用的测试之一。 其是检查用于治疗的药物浓度的基本初步测试,也是确定各种研究领域(如肿瘤学和细胞死亡)药物疗效和安全性的非常重要的测试。 传统上,WST-8 或 ATP 检测(使用代谢活性作为指标)和 BrdU 或胸腺嘧啶核苷检测(使用 DNA 合成水平作为指标)已用于细胞生长特性的定量评估。 尽管这些检测由于其简易性和吞吐量而对我们有益,但这些检测都是间接评估方法,因此结果可能与实际细胞数无关。 在许多情况下,这些检测是终点评估,有时会
一、实验原理 细胞活力检测试剂盒(CCK-8) 可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。 其基本原理为:该试剂中含有WST-8【化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐】,在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲瓒产物(Formazan dye)。生成的甲瓒物的数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。CCK-8法
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。 Ø WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。对于同样的细胞,颜色的深浅和细胞数目呈线性关系。 Ø WST-8是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显
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