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文献和实验乙酸和 0.07% β-巯基乙醇（2ME) （V/V ) 的丙酮（低温）。应在使用前新鲜配制，并置于 -20°C 条件下直到使用（见注释 1)。 注意：3 种试剂均有毒，必须在通风橱中配制。 2.2 清洗溶液 含 0.07% 2ME（V/V ) 的丙酮，可在 -20°C 下贮存约 1 个月。 2.3 R2D2 蛋白质溶解缓冲液 5 mol/L 尿素、2 mol/L 硫脲、2% 3- [ 3 - ( 胆酰胺丙基）二甲氨基 ] 丙磺酸内盐 ( CHAPS；m/V ) 、2%
9599 )。这种溶液叫三氯乙酸/丙酮提取液，-20°C 保存。 ( 2 ) 漂洗液：沉淀蛋白质在预冷丙酮中漂洗，丙酮里加入和上述提取液一样的成分，但是不加三氯乙酸，-20°C 保存。 ( 3 ) 溶解液：7 mol/L 尿素，2 mol/L 硫脲，4% ( m/V ) 3- [ 3 - ( 胆酰胺丙基）二甲氨基 ] 丙磺酸内盐（CHAPS) ，2% ( m/V ) 二硫苏糖醇（DTT ) ，0.4% ( V/V ) 蛋白酶抑制剂（Sigma)，1% ( V/V ) 载体两性电解
硫脲，7 mol/L 尿素，2% 二硫苏糖醇（DTT ) ( m/V )，4% 3- [ 3 - ( 胆酰胺丙基）二甲氨基 ] 丙磺酸内盐（CHAPS) (m/V )。 ( 6 ) N，N - 二甲基甲酰胺（DMF) 。 ( 7 ) CyDyeDIGE 荧光染料 Cy2、C3、Cy5。 ( 8 ) 10 mmol/L 赖氨酸。 ( 9 ) 固定 pH 梯度的缓冲液：0.012%，Amersham Bioscience De Streak 试剂、2 mol/L 硫脲
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