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文献和实验链霉菌抗生物素蛋白―过氧化物酶法 ABC法虽然是一种很好的方法,但是在实际应用过程中.确实也存在许多问题,如亲和 素中含有约?%的糖类,它可与组织中含糖基的物质起反应,造成背景着色。亲和素的等电 点约为10左右。可带较多的负电荷,纤维组织可带较多的正电荷,这两种电荷可互相吸引,造成背景着色。亲和素中有4个结合点,其中一半与连接抗体结合,另一半与复合物结合,如此可降低其敏感性。 为解决和克服存在的问题,20世纪90年代初提出了用链霉亲和素(streptavidin)替代ABC
SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。
SP(streptavidin-perosidase)法,即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。 按标记物质的种类,如荧光染料、放射性同位素、酶(主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶)、铁蛋白、胶体金等,可分为免疫荧光法、放射免疫法、酶标法和免疫金银法等。按染色步骤可分为直接法(又称一步法)和间接法(二步、三步或多步法);按结合方式可分为抗原-抗体结合,如过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)法和亲和连接,如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物(ABC)法、链霉菌抗生物素蛋白
生物素亲和素(又称抗生物素)系统(biotin avidin system,BAS)标记抗体的技术是 20 世纪 70 年代后期发展起来的一种新的免疫检测方法。 由于亲和素与生物素间的亲和力极强,结合迅速,且极其稳定,生物素标记抗体和酶的标记率高,又不影响蛋白的活性,使 BAS 标记技术比常规酶联免疫、放射免疫及荧光免疫技术有着更高的灵敏度,为微量抗原、抗体的检测开辟了新的途径。近年来,在 BAS 检测中多用链霉亲和素“streptavidin,SA”,它是链霉菌培养过程中的分泌物,完整的链霉
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