RNasin Plus，RNasin Pius RNase

说明

RNasin^® Plus RNase Inhibitor (RNasin^® RNA 酶抑制剂) 是一种作为可溶性蛋白在E. coli 中表达的重组哺乳动物RNase 抑制剂，可以利用离子交换和疏水层析相结合的方法纯化获得。该蛋白能够抑制真核RNase( 如RNase A 和RNase B) 活性，与人胎盘RNase 抑制剂相似。RNasin^® Plus RNase Inhibitor 经过RT-PCR 检验，能与AMV、M-MLV 和ImProm-II™ Reverse Transcriptases 或Taq 及Tfl DNA Polymerases 兼容。RNasin^® Plus RNase Inhibitor 在TaqMan^®检测中发现也能和定量、实时RT-PCR 兼容。

与人源的这种蛋白相比，该抑制剂具有更高的抗氧化活性。研究表明来源于人的该蛋白的两个半胱氨酸对氧化非常敏感，并形成二硫键封闭了抑制剂的活性位点。由于天然氨基酸的多样性，RNasin^® Plus RNase Inhibitor 不能形成封闭位点的二硫键。此外，还发现这种重组蛋白具有以前从未认识的特性，即在50℃以上能持续抑制RNase。将RNasin^® Plus RNase Inhibitor 和RNase 的溶液加热再冷却，不会造成RNase 活性的恢复——即使溶液温度超过RNasin^®Plus 蛋白的变性温度。因此，RNasin^® Plus RNase Inhibitor 能够在加热前、加热中及加热后保护RNA，即使在RT-PCR 中第一链DNA合成温度下亦如此。将溶液置于70℃，15 分钟，没有观察到RNase的活性恢复。

. 增强的抗氧化能力：由于天然氨基酸的多样性，RNasin^® Plus RNase Inhibitor 不能形成人源蛋白在氧化条件下会形成的封闭
活性位点的二硫化物。

• 高纯度：RNasin^® Plus RNase Inhibitor 是E. coli 表达的可溶蛋白，利用离子交换和疏水相互作用层析相结合的方法很容易纯化获得。不需要直接亲和层析。这种方法可产生纯度>90% 的抑制剂蛋白，无 E. coli RNase 残留。

• 与RT-PCR 系统兼容：RNasin^® Plus RNase Inhibitor 已被证明可与Access and Access Quick™ RT-PCR Systems、ImPromII™ Reverse Transcription System 和Reverse Transcription System 兼容。同样也被证明可与基于TaqMan^® 的RT-PCR systems 兼容。

• 在RNA 模板变性过程中保护RNA：即使在70℃加热RNasin^® Plus RNase Inhibitor 和RNase 的混合物15 分钟，也不会导致RNA 酶的活性复苏。许多RT-PCR 操作方法需要在RT反应前将RNA 模板在RT 引物存在时变性( 例如65-70℃，5-10 分钟) 以获得最大灵敏度。现在您可以在这一步骤中加入RNasin^® PlusRNase Inhibitor。

• 可保护较高温度下的RT 反应：可在RT 反应过程中加入RNasin^® Plus RNase Inhibitor，与ImProm-II™ 和AMV Reverse Transcriptases 等一起在50℃以上进行反应。在高温下可能存在的RNase 会失活。