RNasin® Plus RNase Inhibitor (RNasin® RNA 酶抑制剂) 是一种作为可溶性蛋白在E. coli 中表达的重组哺乳动物RNase 抑制剂,可以利用离子交换和疏水层析相结合的方法纯化获得。该蛋白能够抑制真核RNase( 如RNase A 和RNase B) 活性,与人胎盘RNase 抑制剂相似。RNasin® Plus RNase Inhibitor 经过RT-PCR 检验,能与AMV、M-MLV 和ImProm-II™ Reverse Transcriptases 或Taq 及Tfl DNA Polymerases 兼容。RNasin® Plus RNase Inhibitor 在TaqMan®检测中发现也能和定量、实时RT-PCR 兼容。
与人源的这种蛋白相比,该抑制剂具有更高的抗氧化活性。研究表明来源于人的该蛋白的两个半胱氨酸对氧化非常敏感,并形成二硫键封闭了抑制剂的活性位点。由于天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor 不能形成封闭位点的二硫键。此外,还发现这种重组蛋白具有以前从未认识的特性,即在50℃以上能持续抑制RNase。将RNasin® Plus RNase Inhibitor 和RNase 的溶液加热再冷却,不会造成RNase 活性的恢复——即使溶液温度超过RNasin®Plus 蛋白的变性温度。因此,RNasin® Plus RNase Inhibitor 能够在加热前、加热中及加热后保护RNA,即使在RT-PCR 中第一链DNA合成温度下亦如此。将溶液置于70℃,15 分钟,没有观察到RNase的活性恢复。
特点
.增强的抗氧化能力:由于天然氨基酸的多样性,RNasin® Plus RNase Inhibitor 不能形成人源蛋白在氧化条件下会形成的封闭 活性位点的二硫化物。
• 高纯度:RNasin® Plus RNase Inhibitor 是E. coli 表达的可溶蛋白,利用离子交换和疏水相互作用层析相结合的方法很容易纯化获得。不需要直接亲和层析。这种方法可产生纯度>90% 的抑制剂蛋白,无 E. coli RNase 残留。
• 与RT-PCR 系统兼容:RNasin® Plus RNase Inhibitor 已被证明可与Access and Access Quick™ RT-PCR Systems、ImPromII™ Reverse Transcription System 和Reverse Transcription System 兼容。同样也被证明可与基于TaqMan® 的RT-PCR systems 兼容。