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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 库存:
244
- 英文名:
Mycoplasma Stain Assay Kit
- 规格:
>100次
特别提示:包括支原体染色检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:支原体染色检测试剂盒
英文名称:Mycoplasma Stain Assay Kit
产品货号:YT161
产品规格:>100次
本试剂盒是用于在培养细胞中原位染色检测支原体或其它原核生物的试剂盒。主要用于检测培养细胞中是否存在支原体污染。本试剂盒如用于六孔板样品检测,至少可以检测100个样品。
试剂盒组分:
固定液——————100ml
Hoechst染色液————10ml
抗荧光淬灭封片液———10ml
培养细胞中的细菌污染、酵母污染或霉菌污染都在光学显微镜下可见,但支原体污染在光学显微镜下不可见,必须通过特定的检测方法进行检测。
检测支原体污染的方法有很多种,包括支原体分离培养、支原体特异酶检测、RT-PCR检测以及DNA荧光染色检测。上述检测方法中,除DNA荧光染色检测外操作步骤相对比较烦琐并且所需时间较长。本支原体染色检测试剂盒是通过Hoechst染色来检测支原体的。本试剂盒的荧光染色可快速、有效、高灵敏度地检测支原体污染。
本试剂盒的检测效果图参考上图。左图为无支原体污染情况,中图为支原体轻度污染情况,箭头所指为微粒状的一些支原体,右图为支原体重度污染情况,可见大量微粒状的支原体。
如果发现有支原体污染,建议更换无污染的细胞进行培养。如果有必要去除支原体,可以使用Mycoplasma Removal Agent、cyprofloxacin或BM-Cyclin去除支原体污染。
注意事项:
1. Hoechst染色试剂对人体有害,请注意适当防护。
2. 固定液含有乙酸,有刺激性气味,宜在通风橱内进行固定操作。
3. 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
4. 检测支原体前最好用不含抗生素的培养液培养2-3代,这样更容易检测出支原体,因为一些抗生素可以抑制支原体生长。
储存条件:-4℃,有效期12个月。
我公司销售的支原体染色检测试剂盒北京品牌,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验Hoechst 33258 Assay Kitfor Mycoplasma DNA 使用说明书 一、原理: 利用荧光染料(bisbenzimide,Hoechst33258)检测支原体污染。这种染料会结合到DNA的A-T富集区域,因为支原体的DNA中A-T含量高(55%~80%),所以可将其染色而被检测到。被支原体污染的细胞经染色后在细胞周围可看到许多大小均一的荧
支原体(Mycoplasma)又称霉形体,广泛分布于自然界(有80余种),为目前发现的最小最简单的细胞,也是唯一一种没有细胞壁的原核细胞。支原体基因组为一环状双链DNA,分子量小,基因数量为480个,直径50-300 nm,能通过细菌滤器,大小介于细菌和病毒之间。菌落小(直径0.1-1.0 mm),在固体培养基表面呈特有的“油煎蛋”状。不能维持固定的形态而呈现多形性,对渗透压敏感,对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。革兰氏染色不易着色,故常用Giemsa染色法将其染成淡紫色。 支原体
下生存(PH7.6—8.0),对酸耐受性差。对热比较敏感,对一般抗生素不敏感。支原体污染细胞后.培养液可不发生混浊.多数情况下细胞病理变化轻微或不显著,细微变化也可由于传代、换液而缓解.因此易被忽视。但个别严重者,可致细胞增殖缓慢.甚至从培养器皿脱落。为确定有无支原体污染可做如下检酗:①相差显微境检测:将细胞按种于事先放置于培养瓶内的盖玻片上,24h后取出,用相差油镜观察.支原体呈暗色微小颗粒位于细胞表面和细胞之间。②荧光染色法:荧光染色用能与DNA特异性结合的荧光染料Hoechst 33258
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