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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
58
- 英文名:
Porcine Endogenous Retrovirus(PERV) Provirus PCR
- 保质期:
1年
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件:
低温避光保存
- 规格:
50T/100T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥3600.0 |
产品名称:猪内源性逆转录病毒前病毒PCR检测试剂盒
英文名称:Porcine Endogenous Retrovirus(PERV) Provirus PCR
准备物品:
猪内源性逆转录病毒前病毒PCR检测试剂盒
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
反应五要素:
猪内源性逆转录病毒前病毒PCR检测试剂盒
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
注意事项:
猪内源性逆转录病毒前病毒PCR检测试剂盒
1.基础程序。
2.扩增温度和延伸温度。
3.反应时间。
4.循环次数。
5.PCR 反应液的配制。
6.PCR技术的基本原理。
7.PCR的反应动力学。
8.PCR扩增产物。
9.PCR反应体系与反应条件。
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文献和实验。临床诊断的品种如HBV/HCV及禽流感诊断试剂盒性能优良、供应充足,基本实现国产化。在猪流感病毒RNA核酸序列明确的情况下,利用现有的试剂研发平台,人感染猪流感实时荧光定量PCR诊断试剂盒很快就会面世。实时荧光定量PCR技术在猪流感诊断中的作用已有法规确立在人感染猪流感病毒出现以前,针对猪与猪传染的传统猪流感疫情,近年来我国科技人员经过不懈努力,探索快速检测与诊断方法].人感染猪流感疫情发生后,美国疾病预防控制中心(CDC)于2009年4月28日发布了针对人感染猪流感病毒治疗和预防临时指南
阳性与血清学阳性,但病毒分离阴性的男性同性恋者进行外周血单个核细胞(PBMC)前病毒DNA序列的测定,发现前者的阳性率为100%,后者也可达60%,对照组则均为阴性,因此提出PCR可以作为病毒分离的替代方法.Imagawa将PCR与其他几种传统方法进行比较,结果在分离出HIV-1前,具有血清阳转的4例男性中3例可用PCR检测出外周血淋巴细胞中gag基因的存在,这种阳性反应可发生在血清阳转前38~42个月,而在得出PCR阳性结果前,无一例分离出病毒,因而认为,对仍从事高危活动(如吸毒、同性
cloning),自1987年即被用于AIDS的研究中.Ou利用针对HIV-1LTR,gag和env基因的三对引物对HIV血清学和病毒分离均阳性与血清学阳性.但病毒分离阴性的男性同性恋者进行外周血单个核细胞(PBMC)前病毒DNA序列的测定,发现前者的阳性率为100%,后者也可达60%,对照组则均为阴性,因此提出PCR可以作为病毒分离的替代方法.Imagawa将PCR与其他几种传统方法进行比较,结果在分离出HIV-1前,具有血清阳转的4例男性中3例可用PCR检测出外周血淋巴细胞中gag基因的存在,这种阳性










