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文献和实验Western Blot 又称为蛋白质印迹,是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的基于抗体抗原之间特异免疫反应的一种定量或定性检测蛋白的实验方法。其基本原理为:聚丙烯酰胺凝胶电泳将不同分子量的蛋白质样品分离,分离后的蛋白被转移到固相支撑物(杂交膜)上,抗体特异性识别目标蛋白,通过酶促反应或者化学发光等方法将目标蛋白可视化,从而对蛋白进行定性或者定量研究。抗体与抗原之间的特异性识别是 Western Blot 实验中最为关键的一个步骤,选择的抗体是否合适、抗体的质量优劣都关乎实验的成败。下面
中常温度,避免过份干燥,防止发脆,本品静电吸附膜的亲水性好,渗滤时间适中,蛋白吸附力强,转膜的蛋白集中而不扩散,显色的灵敏度和特异性高,背景低。NC膜的应用举例 分子杂交 杂交技术有固相杂交和液相杂交之分。固相杂交技术目前较为常用,先将待测核酸结合到一定的固相支持物上,再与液相中的标记探针进行杂交。固相支持物常用硝酸纤维素膜。 固相杂交包括膜上印迹杂交和原位杂交。前者包括三个基本过程:第一,通过印迹技术将核酸片段转移到固相支持物上;第二,用标记探针与支持物上的核酸片段进行杂交;第三,杂交信号
或I、CK-MB 质量,由于这三项指标在AMI 发病时升高的时间窗不同,且特异性与灵敏度高,故三者联用有可能监测心梗早期发病直至发病数天的全过程,并对溶栓疗效判断提供有价值的信息,肌钙蛋白T 还可用于不稳定心绞痛的监测,可望成为预防AMI发生的警示指标。 2.肝胆系统疾病 现今关于胆汁酸检测的方法学发展到第四代试剂盒,测定灵敏度进一步提高并实现了检测管道无污染。 3.呼吸系统疾病 IgG、IgM、IgA、IgE的测定在全国气管炎会议上报告并在国内推广。 常用的胶体金诊断试剂盒有肝炎检测系列
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