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文献和实验染色好? (1) 阴离子染料是较常用的,特别是氨基黑,脱色快,背景低检测极限可达到1.5μg,考马斯亮蓝虽然与氨基黑有相同的灵敏度,但脱色慢,背景高。丽春红S和快绿在检测后容易从蛋白质中除去 ,以便进行随后的氨基酸分析。缺点是:溶剂系统的甲醇会引起硝化纤维素膜的 皱缩或破坏。不能用语正电贺的膜。灵敏度低。 (2) 胶体金,灵敏度高,检测范围可到pg级,但染色比稳定。 (3) 生物素化灵敏度位于1、2之间,可用于任何一种膜。 9. 不能很好地将大分子量蛋白转移到膜上, 转移效率
随后的氨基酸分析。缺点是:溶剂系统的甲醇会引起硝化纤维素膜的 皱缩或破坏。不能用语正电贺的膜。灵敏度低。 (2) 胶体金,灵敏度高,检测范围可到pg级,但染色比稳定。 (3) 生物素化灵敏度位于1、2之间,可用于任何一种膜。 9. 不能很好地将大分子量蛋白转移到膜上, 转移效率低怎么样解决? 可以考虑:转移缓冲液中加入20%甲醇(是指终浓度)(优化的转移缓冲液,可以参考《蛋白质技术手册》),因为甲醇可降低蛋白质洗脱效率,但可增加蛋白质和NC膜的结合能力,甲醇可以防止凝胶变形,甲醇对高分
。8. Western Blot哪种染色好? 答:(1) 阴离子染料是较常用的,特别是氨基黑,脱色快,背景低检测极限可达到1.5 μg,考马斯亮蓝虽然与氨基黑有相同的灵敏度,但脱色慢,背景高。丽春红S和快绿在检测后容易从蛋白质中除去 ,以便进行随后的氨基酸分析。缺点是:溶剂系统的甲醇会引起硝化纤维素膜的 皱缩或破坏。不能用语正电贺的膜。灵敏度低。 (2) 胶体金,灵敏度高,检测范围可到pg级,但染色比稳定。 (3) 生物素化灵敏度位于1~2之间,可用于任何一种膜。9. 不能很好地将大分子量蛋白
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