赛默飞ELISA阻断缓冲液

PCR 新手指南——手把手教您如何正确选择合适的 PCR 酶

酶。 图 1.非特异性扩增（左图）与使用热启动 DNA 聚合酶进行的特异性扩增（右图）。 如何为您的 DNA 聚合酶选择正确的形式 还有更多需要考虑的因素。选择可以简化您工作流程的聚合酶形式。PCR 聚合酶形式的选择包括即用型预混液、用于直接凝胶上样的含染料缓冲液以及用于直接 PCR 分析的所有必要成分的完整试剂盒。 使用预混液，您只需添加模板和引物，然后，开始 PCR 实验。如果您想进一步减少操作步骤，使用含染料缓冲液的聚合酶允许 PCR 产物直接凝胶上样（注意：确保染料与下游应用兼容）。直接

核酸电泳工作流程——5 大主要步骤

)，构象(例如超螺旋、开环或线性）以确保对迁移进行适当比较(了解更多: 结构和构象对样品迁移性的影响） 片段的数量和适当的分离形式，用于大小的估计 预期用途，如分子量标准是设计用于定性分析还是精确的定量测定 不同类型凝胶适用的分子量标准(例如，部分预制凝胶推荐设计特定分子量标准以获得最佳运行结果) 上样染料的性质，避免目的条带模糊(图 1) 上样缓冲液与使用凝胶的兼容性(例如，缓冲液的盐浓度会影响样品的迁移) 图 1. DNA 分子量标准差异。 分子量标准 #2 由色谱纯化的 DNA 片段组成，存在

PCR 的这些小知识，您都知道吗？

。 对于 Taq DNA 聚合酶，缓冲液中一个常见组分是来自 KCl 的 K+，其可促进引物的吸附。有时（NH4）2 SO4 可替代 KCl，NH4+ 有去稳定作用，尤其对于错配碱基间的弱氢键，因此可增强反应特异性。 ...................... 对于 PCR，看似简单，其实蕴藏了很多的学问，本篇只是其中一小部分。想看更多的内容，欢迎访问我们的学习园地，就在 thermofisher.com/mbschool。 文章来源：赛默飞世尔科技