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- 百奥莱博
- YT877-OIF
- 北京
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
395
- 英文名：
Blocking Buffer(10×)
- 保质期：
一年
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件：
4℃
- 规格：
100ml
特别提示：包括封闭液(10X浓缩,不含去垢剂)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
产品名称：封闭液(10X浓缩,不含去垢剂)
英文名称：Blocking Buffer(10×)
产品货号：YT877
产品规格：100ml
本品是最新一代的快速高效封闭液，总体效果显著优于传统的基于BSA(牛血清白蛋白)、脱脂奶粉、酪蛋白(Casein)等的封闭液及国外同类产品，可以用于Western blot (WB)、Immunofluorescence (IF)、Immunohistochemistry (IHC)、Immunocytochemitry (IC) 等实验中的封闭、一抗或二抗的稀释。本产品为10倍浓缩(10X)溶液，不含去垢剂。按照每张膜封闭需要5-10ml 封闭液(1X)计算，一个包装的本产 品可以封闭100-200张膜。
本封闭液快速高效。封闭时间通常仅需5-15分钟，并且和BSA、脱脂奶粉、酪蛋白等传统封闭液以及国外同类的快速 封闭液相比，显示出更强的信噪比(参考下图)。
本封闭液封闭后背景极低。本封闭液不含血清和白蛋白，确保极高的信噪比。
本封闭液兼容性好，兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。本产品中添加了不影响HRP和AP活性的防腐剂，不会干扰HRP或AP标记二抗的检测。同时本产品不含生物素，不会干扰基于生物素的检测。
本封闭液使用灵活。本产品配制在含有适当浓度Triton X-100的TBS中，可以直接用于相关实验，但也可以根据实验需要自行添加Tween-20或Triton X-100 至终浓度为0.05%-0.1%后用于封闭、一抗或二抗的稀释。
本产品与BSA及国外同类产品的封闭效果对比参见下图。在相同样品和实验条件下，仅封闭液及封闭时间存在如下图所示的差异时，我公司的本封闭液封闭后的整体背景明显低于BSA封闭后的背景，而且目的条带亮度明显高于国外同类品牌产品。
每组实验从左到右依次为：5μl蛋白Marker，2.5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液，5μg蛋白量的HeLa细胞裂解液。请注意对于抗体A，本封闭液比BSA和国外同类产品具有更低 的背景，并且和国外同类产品相比信号明显更强。对于抗体B，本封闭液比BSA具有更低的背景，和国外同类产品相比信号明显更强。实际实验结果会因样品、抗体、实验条件等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。
注意事项：
1. 本产品推荐仅使用一次，重复使用可能会导致封闭效果下降。但对于一些信噪比 很高的一抗，例如一些内参抗体，本封闭液可以重复使用2-3次。回收的封闭液请勿与未使用过的封闭 液混合。
2. 通常本产品用于PVDF膜及NC膜时的封闭时间为5-15分钟。对 于一些背景非常高的抗体，可以尝试将封闭时间延长为30-60分钟。此外，如有特殊需要，也完全可以 4℃封闭过夜。
3. 由于没有任何一种封闭液是适用于所有实验体系的，因此对于一些特殊的实验，可能需要 根据具体情况考虑使用其它更合适的封闭液。
4. 取放PVDF膜和NC膜应使用平头镊子，并仅轻轻夹取其边角，操作过程须避免 膜表面产生划痕、折痕或压痕等痕迹。
5. PVDF膜一经浸润和活化，需一直保持湿润，根据Western进行 到的具体步骤可放置于western转膜液或洗涤液等适当溶液中，否则可能会产生难以封闭的异常背景。
6. 在背景较高的情况下，为进一步提高信噪比，本产品稀释至1X后可以自行添加 Tween-20或Triton X-100至终浓度为0.05%-0.1%。
储存条件：4℃，有效期一年。
我公司销售的封闭液(10X浓缩,不含去垢剂)北京厂家，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验的细胞 贴壁和悬浮细胞收集方式不同，细胞裂解液种类各异，推荐含SDS的凝胶加样缓冲液裂解，煮沸即可。 2）动物组织 与细胞不同，组织块由于体积较大，须预先经破碎匀浆处理。 2．样品定量 样品电泳前需测定蛋白浓度，以便保证上样量一致，有利于后续定量或半定量分析。常用的蛋白质浓度测定方法有好多种，其灵敏度和所需时间不同，且不同的方法会受不同干扰物质的影响，实验者可根据样品制备方法（裂解液成分、去垢剂和还原剂种类等）自行选择。 几种蛋白质浓度
，即影响着最终的结果。在实验开始前，仔细阅读抗体说明书，查看其推荐的修复条件。跟泡澡体验相似的是，人太多体验感就差，同理，在修复时不要贪多贪快，微波炉中一次只修复一缸，并根据容器体积，加入其推荐的修复液的量（CST 的推荐用量为 250 ml）。此外为了保证实验具有良好的重复性，我们推荐使用浓缩修复液，这不仅简化了实验准备工作，而且使实验批次间所使用的修复液组分达到更佳的稳定性。在上述大事完成后，我们进行的是 IHC 特色项目——淬灭（即去除内源性过氧化物酶）。目前绝大多数 IHC 都是基于 HRP
细胞收集方式不同，细胞裂解液种类各异，推荐含SDS的凝胶加样缓冲液裂解，煮沸即可。 2）动物组织与细胞不同，组织块由于体积较大，须预先经破碎匀浆处理。 2．样品定量 样品电泳前需测定蛋白浓度，以便保证上样量一致，有利于后续定量或半定量分析。常用的蛋白质浓度测定方法有好多种，其灵敏度和所需时间不同，且不同的方法会受不同干扰物质的影响，实验者可根据样品制备方法（裂解液成分、去垢剂和还原剂种类等）自行选择。 注意事项： a. 应尽量避免引入影响后续定量的杂蛋白（如细胞培养液、蛋白
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