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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
seebio
- 保存条件:
冷冻保存,惰性气体保护
- 英文名:
Succinimidyl Succinate-PEG-Succinimidyl Succinate, Mw 5000
- 规格:
1g
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文献和实验,其中常用的方法有碱裂解法、煮沸法、SDS法和羟基磷灰石层析法等。在实际操作中可以根据宿主菌株的类型、质粒分子大小、碱基组成和结构等特点以及质粒DNA的用途选择不同的方法。本实验介绍最常用的碱裂解法和煮沸法提取质粒DNA。 1. 碱变性法 碱变性法提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性和复性的差异而达到分离的目的。在pH值高达12.6的碱性环境中,染色体的线性DNA的氢键断裂,双螺旋结构解开而被变性;共价闭环质粒DNA的大部分氢键也断裂,但两条互补链不会完全分离,仍会紧密
6-sulfonic acid),2,2'-连氮基-双(3-乙基苯并噻吡咯呆-6磺酸)。6、96孔ELISA板。7、0.15mol/L,pH7.4 PBS:配其它液体用。8、包被缓冲液: 0.05mol/L,pH9.6 Na2CO3-NaHCO3缓冲液。9、洗涤液: 0.05%Tween 20-PBS。10、稀释液:4%PEG-洗涤液(用于稀释标准品和酶标抗体)。11、底物缓冲液:0.1mol/L,pH5.0柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液。12、3%H2O2。13、血清、枸缘酸盐或EDTA抗酸血浆、其它体液及细胞
率最高。 (3)Iodogen与蛋白质的比率是标记率的函数。最大的标记率是1克分子的Iodogen与8克分子或再多量之比。 (四)酰化试剂(Bolton和Hunter试剂)法 1.原理这个方法用酰化剂3--(4-羟苯基)丙酸―N琥珀酰胺酯(Bolton―Hunter试剂)做连接试剂,将125 I标记在羟苯基的2,5位置上,再将琥珀酰胺酯水解,通过一个酰氨键将3--(4―羟基―5―125 I―苯基)接在蛋白或多肽的末端氨基上。 2.方法125
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