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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
66
- 英文名:
Beauveria bassianaPCR
- 保质期:
1年
- 供应商:
江西江蓝纯生物试剂有限公司
- 保存条件:
低温避光保存
- 规格:
50T /100T
| 规格: | 50T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100T | 产品价格: | ¥3600.0 |
产品名称:球孢白僵菌PCR检测试剂盒
英文名称:Beauveria bassianaPCR
反应球孢白僵菌PCR检测试剂盒五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀释液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
产品说明书 1份
注意球孢白僵菌PCR检测试剂盒事项:
1.基础程序。
2.扩增温度和延伸温度。
3.反应时间。
4.循环次数。
5.PCR 反应液的配制。
6.PCR技术的基本原理。
7.PCR的反应动力学。
8.PCR扩增产物。
9.PCR反应体系与反应条件。
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文献和实验球孢白僵菌Beauveria bassiana (Bals.) Vuill 属于链孢霉科。寄生于家蚕幼虫体内(可寄生于60多种昆虫体上),使家蚕病死。干燥后的尸体称为僵蚕。入药能祛风、镇惊等。由于加强防治。近年来白僵菌对家蚕的感染大为减少,为解决僵蚕的药源问题,以蚕蛹为原料,接入白僵菌,所得蚕蛹可代僵蚕用。
是接头引物处于“Y”接头的2个分叉单链上,序列与接头一样,只有与特异引物引导合成了接头的互补序列后,接头引物才能退火参与扩增,流程如图4。 方卫国等尝试将YADE法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究,并取得了成功,建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌YADE体系。在已克隆的类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的基础上,利用YADE法,克隆到该基因的启动子CDEPP。 先酶切球孢白僵菌基因组DNA ,然后与“Y”形接头相连,取连接产物做模板,先以基因
与接头一样,只有与特异引物引导合成了接头的互补序列后,接头引物才能退火参与扩增,流程如图4。 方卫国等尝试将YADE法引入到昆虫病原真菌的分子生物学研究,并取得了成功,建立了适合于球孢白僵菌和金龟子绿僵菌YADE体系。在已克隆的类球孢白僵菌类枯草杆菌蛋白酶基因CDEP-1的基础上,利用YADE法,克隆到该基因的启动子CDEPP。 先酶切球孢白僵菌基因组 DNA,然后与“Y”形接头相连,取连接产物做模板,先以基因特异引物1做线性扩增,再以线性扩增产物为模板,以接头引物和基因特异引物2做指数










