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生物素标记维生素B12(Biotin-VB12)

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    • 英文名

      Vitmin B12-Biotin Conjugate

    • 保质期

      长期

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    • 保存条件

      -20℃

    • 规格

      100μg/200μg

    特别提示:包括生物素标记维生素B12(Biotin-VB12)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


    产品名称:生物素标记维生素B12(Biotin-VB12)
    英文名称:Vitmin B12-Biotin Conjugate
    产品货号:GH0437
    产品规格:100μg/200μg

    本制品是以进口维生素B12与生物素(Biotin)为原料,经化学交联获得的标记物,本品溶于PBS(pH7.4)中,蛋白浓度≥1mg/ml,含稳定剂,可作为标记物用于维生素B12及其抗体的检测以及其受体与转运蛋白的研究。经稀释后可用于ELISA检测,效价≥1:5000。

    维生素B12(Vitamin B12,Vit B12,B12)又称钴胺素(Cobalamin),qíng钴胺素(Cyanocobalamin),参与甲基及其他一碳单位的转移反应,是几种变位酶的辅酶,如甲基天冬氨酸变位酶、甲基丙二酰CoA变位酶。B12是所有呈现qíng钴胺素生物活性的类咕啉的总称。高等动植物不能制造维生素B12,所以植物性食物中基本上没有B12,但鱼、蛋、肉、肝中含量丰富。自然界中的B12都是微生物合成的,肠道细菌也可以合成,故一般情况下不缺乏,但是素食者容易缺乏。B12也是红血球生成不可缺少的重要元素,如果严重缺乏,将导致恶性贫血。B12的吸收需要一种胃肠道分泌物(内源因子)帮助才能被吸收,是维生素中惟一需要内因子辅助才能吸收的维生素。由于肠胃功能异常,缺乏这种内源因子,即使膳食中B12来源充足也会患恶性贫血。它在肠道内停留时间长,大约需要三小时(大多数水溶性维生素只需要几秒钟)才能被吸收。B12的生理功能是参与制造骨髓红细胞,防止恶性贫血,防止大脑神经受到破坏。
    B12作为甲基转移酶的辅因子,参与蛋氨酸、胸腺嘧啶等的合成,因此B12可促进核酸与蛋白质的生物合成,缺乏时影响婴幼儿的生长发育;还可以保护叶酸在细胞内的转移和贮存,所以缺乏时,人类红细胞叶酸含量低,肝脏贮存的叶酸降低,这可能与维生素B12缺乏,造成甲基从同型半胱氨酸向甲硫氨酸转移困难有关。总之,B12的功能主要是:
    1.促进红细胞的发育和成熟,使肌体造血机能处于正常状态,预防恶性贫血;维护神经系统健康;
    2.以辅酶的形式存在,增加叶酸的利用率,促进碳水化合物、脂肪和蛋白质的代谢;
    3.具有活化氨基酸、促进核酸与蛋白质生物合成的功能,对婴幼儿的生长发育有重要作用;
    4.参与脂肪酸代谢,促进脂肪、碳水化合物、蛋白质等的利用;
    5.参与神经组织中脂蛋白的形成,增强记忆及平衡感,可消除烦躁不安,注意力不集中等,是保持神经系统功能健全不可缺少的维生素。
    B12对于动物机体生长也是一种不可缺少的微量营养物质,缺乏B12可使动物生长发育停滞,出现红细胞性贫血。此外,还可使生殖率和卵的孵化率降低。因此,B12不仅是食品添加剂,食品着色剂,还是重要的饲料添加剂。

    保存条件:-20℃或以下温度保存。勿反复冻融或于4℃以上久置。

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      。 9. 最后,样品加入叠氮钠(终浓度0.5 g/L)及1.0 g/L BSA。将结合产物置4℃,避光保存,亦可加入50%重蒸甘油,置-20℃保存。 要点: 1. 如在反应混合液中有叠氮钠或游离氨基存在,会抑制标记反应。因此,蛋白质在反应前要对0.1 mol/L 碳酸氢钠缓冲液或0.5 mol/L 硼酸缓冲液 2. 所用的NHSB及待生物素化蛋白质之间的分子比按蛋白质表面的ε-氨基的密度会有所不同,选择不当则影响标记的效率,应先用几个不同的分子比来筛选最适条件。

    • 生物素标记蛋白操作方法

       HABA/Avidin”。 3. 吸取100 ul 生物素标记的蛋白于杯中并测定500 nm 的吸光度值,记为A500 HABA/Avidin/Biotin (数值必须恒定15s 以上)如果A500 HABA/Avidin/Biotin的值不超过(≤)0.3,重新稀释待测样品并检测。 注:计算结果时必须考虑稀释度。 4. 计算Biotin/Protein摩尔比 ①A=生物素化的蛋白毫摩尔浓度=蛋白浓度(mg/ml)/蛋白的分子量 ②B=500nm处的吸光度变化 △

    • 光敏生物素对探针的标记

      步骤   1. 在一支灭菌的Eppendof离心管中加入20μl探针DNA(0.5-1μg/μl,溶解于水中 2. 避光条件下加等体积的光敏生物素醋酸盐并混匀。    3. 将装有反应液的离心管置于冰模中,暗室中在光标记灯下照射30分钟(灯距样品15cm)。 4. 加入无菌水至总体积为100μl 5. 加入100μl仲丁醇,混匀。10000rpm离心10min,去上层液,再加入仲丁醇,离心,使水相浓缩至30

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