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文献和实验离心机的工作原理是:在超强的离心力作用下,使旋转中的样品逐渐偏离旋转中心,从而达到沉降分离的效果。虽然离心机的原理很简单,但是其适用于大量不同的工业应用和研究实验,离心相关的技术文献非常之多。 实验室常规离心机 台式离心机/贝克曼库尔特Allegra X-5 高速离心机/赛默飞世尔科技Sorvall LYNX 细胞培养离心机套装/海蒂诗 值得注意的是,离心的分离效率与旋转半径成正比,而与转速(指每秒或每分钟的旋转速度,通常用每分钟
冰上,用冰冷的 PBS 洗涤细胞。2. 吸出 PBS,然后加入冰冷的裂解缓冲液(每 107 细胞/100 mm 培养皿/150 cm2 培养瓶加入 1 ml;每 5×106 细胞/60 mm 培养皿/75 cm2 培养瓶加入 0.5 ml)。3. 用预冷的塑料细胞刮棒刮下贴壁细胞,然后轻轻地将细胞悬浮液转移至预冷的微量离心管中。4. 在 4 ℃ 下持续搅拌 30 分钟。5. 在 4 ℃ 预冷的离心机中以 16000 × g 的转速离心 20 分钟。6. 轻轻地从离心机中取出离心管,置于冰上。将上清
细胞。刮去每块板上的细胞到 1 ml 冰冷的 EBC 裂解缓冲液中。 将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上 4 ℃ 以最大速度离心 15 min。 收集上清(约 30 ml)并加入 30 μg 的适当抗体,4 ℃ 摇动免疫沉淀物 1 h。 加入 0.9 ml 的蛋白质 A-Sepharose 悬液,4 ℃ 摇动免疫沉淀物 30 min。 用含 900 mmol/L NaCl 的 NETN 洗蛋白 A-Sepharose 混合物,再重复洗 5 次。最后,用 NETN 洗
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