免疫组化检测试剂盒(AP显色)(小鼠IgG)

特别提示：包括免疫组化检测试剂盒(AP显色)(小鼠IgG)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：免疫组化检测试剂盒(AP显色)(小鼠IgG)
英文名称：SABC Kit-AP(Mouse IgG)
产品货号：QN2755
产品规格：100T-200T

本试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验AP显色。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC 即 StreptAvidin—Biotin Complex。

试剂盒组成：

组分	规格
封闭液（5% BSA）	10ml
Bio-羊抗小鼠 IgG 浓缩液	100μl
SABC-AP 浓缩液	100μl
稀释液	30ml
1×AP 反应缓冲液	30ml
25×BCIP	1ml
25×NBT	1ml

保存条件：-20℃

操作步骤（以石蜡切片为例，仅作参考）：
1．切片常规脱蜡至水(三次二jiǎ苯，三次乙醇)。
2．可选步聚：
  a、热修复抗原，
  b、酶消化，
  c、跳过此步，直接进入下一步。
3．滴加 5%BSA 封闭液，室温 20分钟。甩去多余液体，不洗。
4．用稀释液将一抗按一定比例稀释（稀释后的一抗 4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。TBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。具体稀释度和孵育时间参考一抗生产厂家说明书。）
5．根据用量，用稀释液将 Bio-羊抗小鼠 IgG 浓缩液按 1:100 稀释成工作液(1ml稀释液加入 10μl Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液混匀。此工作液 4℃可保存一周)。滴加 Bio-羊抗小鼠 IgG 工作液，20-37℃ 30分钟。TBS（pH7.2-7.4） 洗2分钟×3次。
6．根据使用量，用稀释液将SABC-AP浓缩液按 1:100 稀释成工作液(1ml稀释液加入10μl SABC-AP浓缩液混匀。此工作液4℃可保存一周)。滴加 SABC-AP工作液，20-37℃，30分钟。TBS（pH7.2-7.4）洗 5分钟×4次。
7．根据用量，1ml AP缓冲液中加入40μl NBT溶液，混匀后再加入40μl BCIP溶液。此工作液现用现配。室温显色, 镜下控制反应时间。蒸馏水洗涤终止反应。

  * 对于冰冻切片，固定后，TBS 漂洗两次，接上述第二步

注意事项：
如果染色背景过高，在SABC反应之后，AP显色之前，用加有 0.01～0.02% TWEEN-20的TBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，TBS洗2次，然后AP显色。因为免疫组化指标众多，标本不一，本操作步骤仅作参考。

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