细胞培养板/带低蒸发盖板（悬浮培养）

转基因小鼠模型的建立(SOP)

。 5. 子代鼠外源基因整合和表达的检测。 6. 转基因小鼠品系的建立。 优点： （1）外源基因在宿主染色体上的整合率相对较高； （2）此法导入外源基因无需载体； （3）转基因小鼠得率在 60%-80%； （4）导入的外源基因可长达 50 kb。 不足之处： （1）外源基因随机整合； （2）个别原核不清晰，需进行特殊处理； （3）需大型精密仪器，费用昂贵； （4）操作周期相对较长。 二、实验器材的准备 1．输精管切除术用器材： 弯式有齿镊、直式有齿镊、显微镊、手术剪、自动小夹涂药器、自动小夹、带

植物质膜蛋白的提取和溶解

细胞膜 [2] 。PM 比其他膜带更多的负电荷并且因此可以有效地跟其他细胞膜分离。但这种做法需要一个特殊的自由流电泳仪装置。 ( 3 ) 用两相分离法分离 PM 部分依赖于膜囊泡之间不同起源的表面特性。这一技术潜在的原则是众多的水溶高分子质量的聚合物超过一定浓度不相互混合，而是形成分离相，每个分离相包含 85% 以上的水。这种含聚合物的分离相很适合做生物分析材料。根据不同的表面特性加入的膜在水性聚合物相之间被分离这项技术最初由 Laesson 等 [ 3 ]描述，现在由于它实现了 PM 蛋白的高产和没有

细胞培养常见问题解答

，如果少了，箱内的空气湿度不够，会造成培养液挥发加快，这样即使刚加的液体不少，过一段时间，由于蒸发，液体量会减少，造成中央干涸。并且这样会改变了培养液的成分浓度，造成渗透压过高。 个人经验认为这是物理问题:24孔板小，细胞接种进去后是很难摇均匀的，结果导致细胞重贴壁后呈现四周密中间稀的状况. 至于中间较多死细胞，如果是悬浮状的话，也一样是物理问题。接种后比较粗暴的碰撞，似乎对摇均匀细胞有一定效果. 在为多孔板培养的细胞换液时一定要注意，不要把培养基吸得太干