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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
377
- 英文名:
Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit
- 保质期:
一年
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
4℃可
- 规格:
400T|800T|1600T
特别提示:包括免疫组化试剂盒(兔源一抗)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:免疫组化试剂盒(兔源一抗)
英文名称:Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Rabbit
产品货号:ZN1839
产品规格:400T|800T|1600T
本试剂盒采用SABC系统,适于一抗为兔来源抗体。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有极高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍,等电点 pI=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶可以保证SABC具有很高的敏感性。所以 SABC 兼具高敏感性,低背景和操作简便等优点。百奥莱博采用独特方法生产的SABC不仅有很强的信号放大作用,而且非常稳定。
试剂盒组成:
| 组分 | 规格 |
| 山羊血清封闭液(效价1:10) | 2.5ml/5ml/10ml |
| 生物素标记山羊抗兔IgG(效价1:100) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
| SABC(效价1:100) | 0.25ml/0.5ml/1ml |
附有三个滴瓶供稀释试剂用。稀释液可选用TBS或PBS缓冲液
保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以 消除内源性过氧化物酶活性 。PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。滴加山羊血清封闭液(效价1:10), 37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(兔IgG),37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加生物素标记山羊抗兔IgG(效价1:100),37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
7. 滴加 SABC(效价1:100),37℃孵育30 分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
8. 显色液显色,镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。脱水,透明。
10. 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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文献和实验位。 IF(免疫荧光检测)是采用荧光素标记物作为探针,形成的抗原抗体复合物上带有荧光素,在荧光显微镜下,受激发光的照射后发出一定波长的荧光,从而对细胞、组织中的抗原进行定位或定量。 表 1 IHC/ICC与IF特点对比 IHC/ICC 与 IF 染色中使用的抗体主要为一抗与二抗,根据是否选用二抗以及二抗标记物类型可形成多种不同的检测系统。信号放大是免疫组化实验中的重要步骤,信号放大可以使目标蛋白质的信号从微弱到明显,从而更容易被观察和定量。现有的信号放大技术多为链霉亲和素-生物素法,该方法基于链酶亲和
的 ABC 法和 SP 法中,免疫组化反应结果容易收到内源性过氧化物酶和生物素的干扰,必须用过氧化氢和卵白素等进行灭活。灭活内源性 POD 一般 3% 过氧化氢灭活时间短点,可以 10 min 左右,而 0.3% 过氧化氢则可以适当延长封闭时间,一般 10~30 min;用甲醇配置过氧化氢比双蒸水或PBS可能好在保护抗原和固定组织作用,过氧化氢孵育时间过长易引起脱片;现用现配,配好后 4 度避光保存。不过,现在已有“第二代即用型免疫组化试剂盒”避免内源性生物素的干扰,推荐使用。 7、血清封闭:组织
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