粪便基因组DNA提取试剂盒（磁珠法)价格

特别提示：包括粪便基因组DNA提取试剂盒（磁珠法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：粪便基因组DNA提取试剂盒（磁珠法)
英文名称：Magnetic Stool DNA Extraction Kit
产品货号：WH0114
产品规格：50次|200次

本试剂盒适用于粪便样本以及肠道微生物的提取DNA。

产品特点：
·操作便捷：能够集中在相对较短时间内完成实验操作。
·高纯度：与磁珠法纯化相结合，提取的DNA纯度高，可直接用于下游实验

试剂盒组成：

组分	50次	200次
缓冲液SA	45ml	120ml
缓冲液SC	5ml	25ml
缓冲液SH	10ml	45ml
缓冲液GFA	10ml	30ml
去蛋白液RD	24ml	90ml
漂洗液PWD	20ml	2×40ml
洗脱缓冲液TB	15ml	30ml
1mm研磨珠	15g	60g
磁珠悬浮液G	0.5ml	2×1ml

储存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中孵育10min，以溶解沉淀。

选配试剂：RNase A（10mg/ml） （目录号：WH0217-02）

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。）
1．新采取的样本会得到更高的得率，不同样本在采样前应先查阅相应的最佳保存条件。
2．在需要吸取上清液的步骤中应避免吸到沉淀，否则会影响产物纯度。
3．缓冲液GFA、去蛋白液RD和漂洗液PWD使用前请参照瓶上标签加入相应的醇。
4．过量的DNA可能抑制下游PCR反应，遇到这种情况建议将DNA模板进行稀释后使用。
5．使用前检查缓冲液SC是否有沉淀，若有沉淀，请在37℃加热至完全溶解后使用。
6．粪便样本中可能有RNA残留，如果需要去除RNA，需自备RNase A溶液（目录号：WH0217-02）。

操作步骤：
使用前请先在缓冲液GFA中加入异bǐng醇；在去蛋白液RD和漂洗液PWD中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上标签。

1．样本处理
  在2ml离心管中加入样本0.25-0.5g，如果是液态样本则转移200μl至离心管中，加入500μl缓冲液SA、100 μl缓冲液SC和0.25g研磨珠，（粪便样本中可能有RNA残留，如果需要去除RNA，建议再加入10 μl RNase A）涡旋震荡混匀或组织匀质仪震荡混匀后70℃加热裂解15min提高裂解效率。12000rpm （~13400×g)离心1 min，转移上清液（约500 μl）至新的2ml离心管。
  注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可将温度提高至95℃以促进裂解。
2．加入200μl缓冲液SH混匀，涡旋5 sec，4℃放置10min。
3．12000rpm （~13400×g )离心3 min，转移上清液至新的2ml离心管，加入500 μl缓冲液GFA（使用前请先检查是否已加入异bǐng醇），颠倒混匀。
  注意：转移上清时不要移走沉淀，否则可能降低DNA纯度。
4．加入10 μl磁珠悬浮液G，振荡混匀5 min。
  注意：为了确保磁珠彻底重悬，请在使用前振荡混匀
5．将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
6．将离心管从磁力架上取下，加入700 μl去蛋白液RD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），振荡混匀5 min。
7．将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
8．将离心管从磁力架上取下，加入700 μl漂洗液PWD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），振荡混匀3 min。
9．将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸去液体。
10．重复步骤8和9一次。
11．将离心管于磁力架上，室温晾干5-10min。
  注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以免难以洗脱DNA。
12．将离心管从磁力架上取下，加入50-100 μl洗脱缓冲液TB，振荡混匀，置于56℃，孵育5 min，期间震荡混匀3回，每回3-5次。
13．将离心管放置于磁力架上静置2 min，磁珠完全吸附后，小心将DNA溶液转移至一个新离心管中，并于适当条件保存。

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