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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
411
- 保质期:
12个月
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 保存条件:
RT
- 规格:
100ml
特别提示:包括Western抗体洗脱液(酸性)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:Western抗体洗脱液(酸性)
产品货号:GL1547
产品规格:100ml
用途:
亦称为蛋白印迹膜再生液或Western一抗二抗去除液,用于Western中转移了蛋白的膜的重复利用
注意事项:
将用过的膜浸入stripping buffer中,50℃水浴30min,振荡后,TBST洗清洗。
储存条件:室温,12个月
我公司销售的Western抗体洗脱液(酸性)现货供应,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验转膜缓冲液非常有帮助。如果 PI 接近转膜缓冲液的 pH 的话,蛋白质电离程度小,带的电荷就少,转印效率就会非常低。所以对这种蛋白质,你选择常规的 pH8.8 的转膜缓冲液可能就不合适,至少应该选 pH11 的 CAPS 转膜缓冲液或者用 0.7% 乙酸的酸性转膜液效果才会比较好。否则不管你转膜时间多长,蛋白质都在凝胶里一动不动,显然实验室不会出结果的。如果你用酸性转膜液的话,记得把膜放在凝胶的上面,因为此时蛋白质是往负极移动的。
(1)体内诱生法 取Balb/c小鼠,首先腹腔注射0.5 ml液体石腊或降植烷进行预处理。1-2周后,腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖,并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周,可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可获得大量单克隆抗体。 (2)体外培养法 将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养。在培养过程中,杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体,收集培养上清液,离心去除细胞及其碎片,即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限。近年来,各种新型培养技术和装置不断出现,大大提高了抗体的生产
转膜效率低:转膜效率受多种因素影响,包括蛋白的大小、凝胶中丙烯酰胺的百分比、电场强度、转印时间和缓冲液的PH值。一般来说,蛋白越大,转移的越慢。转移大蛋白最好的方法是用高的电场强度。而小蛋白长时间处于高电场强度下可能会传出转印膜。避免这个问题的方法是用0.2μm孔径的PVDF膜进行转印。如果蛋白的等电点接近缓冲液的pH值,那么这个蛋白携带的电荷很少,在电场中页几乎不移动。如果你的目的蛋白是强碱性的,那么你可以用碳酸盐(pH9.9)、CAPS(pH11)及酸性缓冲液。 在转印之后
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