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Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
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长期
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北京百奥莱博科技有限公司
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的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于RT
- 规格:
100T
特别提示:包括双荧光素酶报告基因检测试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:双荧光素酶报告基因检测试剂盒
英文名称:Dual Luciferase Reporter Gene Assay Kit
产品货号:KFS303
产品规格:100T
双萤光素酶报告基因检测试剂盒,是先以萤光素(luciferin)为底物来检测萤火虫萤光素酶(Firefly luciferase),后以肠腔素(coelenterazine)为底物来检测海肾萤光素酶(Renilla luciferase),并且在后续加入海肾萤光素酶底物时,同时加入抑制萤火虫荧光素酶催化luciferin 发光的物质,使后续检测仅仅检测到海肾萤光素酶的活性,实现双萤光素酶报告基因检测。萤火虫萤光素酶是一种分子量约为61kD 的蛋白,在ATP、镁离子和氧气存在的条件下,可以催化luciferin 氧化成oxyluciferin,在luciferin 氧化的过程中,会发出生物萤光(bioluminescence)。海肾萤光素酶是一种分子量约为36kD 的蛋白,在氧气存在的条件下,可以催化coelenterazine 氧化成coelenteramide,在coelenterazine 氧化的过程中也会发出生物萤光。生物萤光可以通过化学发光仪(luminometer)或液闪测定仪进行测定。
注意事项
1.无菌操作。
2.荧光染料操作中注意避光进行。
3.由于温度对酶反应有影响,所以测定时样品和试剂均需达到室温后再进行测定。
4.为保证荧光素酶检测试剂的稳定性,可以采取适当分装后避光保存的方法,以避免反复冻融和长时间暴露于室温。
5.萤火虫荧光素酶检测试剂、Renilla 荧光素酶检测试剂最好现用现配。
6.细胞裂解液及裂解时间可根据细胞量适当增加、延长。
我公司销售的双荧光素酶报告基因检测试剂盒价格,质量上佳,价格普惠,欢迎广大新老客户踊跃订购。
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文献和实验在用萤火虫荧光素酶定量基因表达时 ,通常采用第二个报告基因来减少实验的变化因素。但传统的共报告基因(比如CAT,β-Gal,GUS)不够便利。因为各自的测试化学,处理要求,检测特点存在差异。Promega提供一种先进的双报告基因技术,结合了萤火虫荧光素酶测试和海洋腔肠荧光素酶测试。双荧光素酶报告基因测试系统,结合pRL载体系统,表达第二个报告基因海洋腔肠荧光素酶,在单管中进行双荧光素酶报告基因测试,快速,灵敏,简便。系统还提供PLB裂解液,用来裂解在多孔板中培养的哺乳细胞,不需操作单个样品
【求助】请教一个关于双荧光素酶报告基因检测系统中共转染两种报告基因质粒的比例的问题?
lsdcfhyj 用双荧光素酶报告基因检测系统进行报告基因检测时需要共转染两种荧光素酶报告基因质粒,但是我不知道两种质粒间的比例是多少,有哪位前辈做过这方面实验的,请帮我指点一下,谢谢了 xxshc 这个比例没有特别的规定。我用的pRL-TK(海蜃素荧光素酶)的荧光值要高一些,我转20ng/孔(24孔板),作为内参.pGL3(萤火虫荧光素酶)的荧光值低一些,我转0.4ug/孔(24孔板)然后0.4ug的调整质粒。这样的话,萤火虫荧光素酶
1、双荧光素酶实验原理; 2、验证转录因子与启动子互作; 3、验证miRNA与mRNA互作
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