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- 文献和实验
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88
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上海源叶生物科技有限公司
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现货
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二年
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1米/卷
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文献和实验酶解反应。 二、冻溶法从琼脂糖凝胶中回收DNA 在重组DNA或探针标记等实验中,常常需要从凝胶中回收和纯化DNA,常用的回收方法有:压碎浸泡法、透析袋洗脱法、低熔点琼脂糖法和DEAE—纤维素膜法等。 [操作方法] (1) 从琼脂糖凝胶中将含有拟回收DNA片段的胶块切下,置于Ep管内。 (2) 用一次性注射器将胶由针头处挤入Ep管内,加等体积Tris平衡酚混匀后,置液氮10min。 (3) 取出离心,5000g,5min。 (4) 小心地将水相转移至另一Ep管中
Northern杂交或Sl 核酸酶作用图分析时,与总RNA相比,采用poly(A) + RNA能获得更为满意的结果。 可以按照Gilham(1964)所述方法制备Oligo(dT)-纤维素,也可以买现成的产品。 1)用0.1mol/L NaOH悬浮0.5-1.0g 0ligo(dT)-纤维素。 2)将悬浮液装入灭菌的一次性层析柱或装入填有经用DEPC处理并经高压灭菌的玻璃棉的巴期德吸管中, 柱床体积为0.5-1.0ml,用3倍柱床体积灭菌水冲洗柱床。柱床体积为1m
下来,那就不能用了。凝胶类的填料很容易长菌,用完得洗干净,保存在20%的乙醇中。 26) 我想在想纯化peg修饰的蛋白,可是我目前只有弱阳离子交换的羧甲基纤维素,你看能不能纯化阿,好像文献上都用sp-sepharose,纤维素是不是不行啊?另外,目前没有专门的层析装置和蠕动泵,我用普通的层析柱是不是就可以阿,流量是不是也不用太精确阿?谢谢! 离子交换的方法是可以的,但是我觉得疏水也很值得一做,因为修饰后电荷变化了,其实疏水性也增加了,所以这些方法都可以,此外只要你的CM纤维素能挂住
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