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上海源叶生物科技有限公司
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现货
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二年
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1米/卷
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文献和实验的方法进行回收,如电泳洗脱法:在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶,将其装入透析袋(内含适量新鲜电泳缓冲液),扎紧透析袋后,平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中,100V电泳2~3小时,然后正负电极交换,反向电泳2分钟,使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液,进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。 其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等,但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段(<1kb)的回收,随着DNA分子量的增大,回收量显著下降。 (三)等电聚焦电泳
电泳技术(electrophoretic techniques)的应用
样品的分离情况,对需要的DNA分子或特殊片段可从电泳后的凝胶中以不同的方法进行回收,如电泳洗脱法:在紫外灯下切取含核酸区带的凝胶,将其装入透析袋(内含适量新鲜电泳缓冲液),扎紧透析袋后,平放在水平型电泳槽两电极之间的浅层缓冲液中,100V电泳2-3小时,然后正负电极交换,反向电泳2分钟,使透析袋上的DNA释放出来。吸出含DNA的溶液,进行酚抽提、乙醇沉淀等步骤即可完成样品的回收。 其它还有低融点琼脂糖法、醋酸铵溶液浸出法、冷冻挤压法等,但各种方法都仅仅有利于小分子量DNA片段(<1kb)的回收
菌种接种于 500 mL LB 培养液 (含用于筛选的抗生素) 中,37 ℃ 以 225 rpm 速度振荡培养 12~16 小时;2. 10,000 rpm,4 ℃ 离心 15 min 收集菌体;3. 将细菌悬浮于 100 mL 预冷的 STE(0.1M NaCl,10 mM Tris.Cl,pH8.0,1 mM EDTA,pH8.0)中,12,000rpm 离心收集菌体;4. 将菌体悬于 10 mL 细菌悬浮液中,再移至 50 mL 离心管中;5. 加入 1 mL 用 10 mM Tris.Cl (pH







