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人淋巴成纤维细胞

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      上海烜雅生物科技有限公司

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    • 英文名

      Human Lymph :Normal Lymphatic Fibroblasts

    • 运输方式

      常温运输/干冰运输

    人淋巴成纤维细胞简介:
    人淋巴成纤维细胞分离自正常人淋巴节,成纤维细胞是胚胎中胚层起源的间叶细胞。纤维原细胞分泌富含I和,或III型胶原的细胞外基质。烜雅生物科技提供的人淋巴成纤维细胞均来自新鲜组织,用于培养人淋巴成纤维细胞的组织采集于地方医院,组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人淋巴成纤维细胞培养试剂盒(Human Lymph PrimaCell™: Normal Lymphatic Fibroblasts Cat No. 3-0428)来优化目的细胞生长条件,以降低杂细胞(如脂肪细胞、纤维细胞等)的污染,同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下,人淋巴成纤维细胞传10代以上仍可以保持原代细胞的分化状态,进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。

    人淋巴成纤维细胞使用方法:
    1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
    取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

    2、细胞传代:
    待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
    方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
    方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

    3、细胞冻存:
    1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
    2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
    3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。 

    4、细胞复苏:
    1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
    2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
    3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
    4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

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