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- 详细信息
- 技术资料
- 供应商：
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存：
36
- 英文名：
Human Vascular: Normal Vascular Endothelial Cells
- 运输方式：
常温运输/干冰运输
- 免疫类型：
详询
人血管内皮细胞简介：
内皮细胞通过分泌内皮源性血管收缩因子和内皮源性血管舒张因子，调节和降解血管活性肽以及内皮细胞表面的酶，达到进一步调节血管张力的功能。这些功能在不同的部位，不同器官的血管，以及大循环和微循环之间均存在着不同。烜雅生物科技提供的人血管内皮原代细胞均来自新鲜组织，用于培养人血管内皮原代细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人血管内皮细胞培养试剂盒(Human Vascular PrimaCell™: Normal Vascular Endothelial Cells Cat No. 3-0190)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下，人血管内皮原代细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
人血管内皮细胞使用方法：
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出15ml离心管，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
待细胞达到一定密度（不超过1x10^6/ml）可按照以下方法换液培养或传代。
方法①：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：
1）将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
2）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
3）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
内皮细胞通过分泌内皮源性血管收缩因子和内皮源性血管舒张因子，调节和降解血管活性肽以及内皮细胞表面的酶，达到进一步调节血管张力的功能。这些功能在不同的部位，不同器官的血管，以及大循环和微循环之间均存在着不同。烜雅生物科技提供的人血管内皮原代细胞均来自新鲜组织，用于培养人血管内皮原代细胞的组织采集于地方医院，组织的采集根据美国IRB 和 HIPAA批准的方案进行。细胞的培养采用公司专利产品人血管内皮细胞培养试剂盒(Human Vascular PrimaCell™: Normal Vascular Endothelial Cells Cat No. 3-0190)来优化目的细胞生长条件，以降低杂细胞（如脂肪细胞、纤维细胞等）的污染，同时保证质量的稳定。在烜雅生物技术部标准的操作流程下，人血管内皮原代细胞可以保持原代细胞的分化状态，进而可以用于评估体外药物模型系统和调节特定基因的遗传功能。
人血管内皮细胞使用方法：
1、您收到细胞后，请按照以下方法进行操作：
取出15ml离心管，75%酒精擦拭培养瓶，拆下封口膜，放入37℃，5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态，然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代：
待细胞达到一定密度（不超过1x10^6/ml）可按照以下方法换液培养或传代。
方法①：收集细胞，1000rpm离心5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：
1）将细胞悬液转移至15ml离心管中，1000rpm离心5min；
2）用适量的冻存液（FBS：DMSO=9 ：1）重悬细胞，并放置于冻存管中；
3）先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h，然后将其移入-80℃过夜，24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏：
1）从液氮中取出细胞冻存管（注意：佩戴防爆管面具），快速将其置入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁；
2）将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中， 1000rpm离心5min；
3）弃上清，沉淀用5ml完全培养基重悬，接种25cm2培养瓶，于37℃，5%CO2细胞培养箱中培养；
4）第二天，换用新鲜完全培养基继续培养。
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