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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
45
- 细胞形态:
淋巴母细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 生长状态:
悬浮
- 英文名:
WERI-Rb-1
中文名称:人视网膜神经胶质瘤细胞
简称:WERI-Rb-1
细胞培养条件:RPMI-1640+10% FBS
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:淋巴母细胞
来源:ATCC
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:WERI-Rb-I细胞株是1974年R.M. McFall 和 T.W. Sery建立的两株人眼癌细胞系中的一株。 细胞能在Difco Bacto-Agar中存活但不形成克隆。 扫描电镜显示在表面囊泡,板状伪足和微绒毛在数量上和频率上的改变。 细胞分化研究,肿瘤治疗的动物模型和生化评价都涉及这株细胞。
本产品仅供科研!
WERI-Rb-1人视网膜神经胶质瘤细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验亦称肿瘤抑制基因(tumor suppressor gene)或隐性致癌基因(recessive onco-gene)。该类基因之存在可抑制细胞恶变,其丢失或失活(二倍体细胞中二个等位基因都失活)情况下促进细胞癌变。首次被鉴定出的是抗癌基因 Rb(Retinoblas-toma),它是从人的视网膜细胞瘤中鉴定出的人类肿瘤抑制基因,位于人染色体13q14上,其产物为plo5Rb,定位在细胞核内。Rb二个等位基因的丢失或失活与人视网膜细胞瘤发生有关。Rb表达不仅在视网膜细胞瘤中
microRNA-195通过直接影响靶基因Cyclin D1和Cyclin E1的表达 抑制了人神经胶质瘤细胞的增殖
器,它可以调节多种靶基因的表达,引起肿瘤细胞中异常信号的传递,从而影响肿瘤的增殖。先前的研究发现,与人正常的星形胶质细胞和非肿瘤组织相比,miR-195在神经胶质瘤细胞系和人的早期胶质瘤组织中表达显著下调。上调miR-195的表达显著降低了神经胶质瘤细胞的增殖。流式细胞仪分析表明,miR-195的异常表达使S期细胞的百分数明显下降,G1/G0期细胞的百分数增多。过表达miR-195也显著降低了神经胶质瘤细胞的非依赖型锚定生长能力。而且,在神经胶质瘤细胞中,过表达miR-195也降低了磷酸化视网膜母细胞
RB基因即成视网膜细胞瘤基因,为视网膜母细胞瘤易感基因,是世界上第一个被克隆和完成全序列测定的抑癌基因。RB基因转录产物约4.7kb,表达产物为928个氨基酸组成的蛋白质,分子量约105kDa,称为P105-Rb。Rb蛋白分布于核内,是一类DNA结合蛋白。Rb蛋白的磷酸化/去磷酸化是其调节细胞生长分化的主要形式,在细胞周期的G。、G1期,它表现为去磷酸化,在G。、S、M期则处于磷酸化状态。
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