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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
36
- 生长状态:
贴壁细胞
- 运输方式:
常温运输/干冰运输
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 英文名:
HepG2.2.15
中文名称:HepG2.2.15表达HBV病毒的人肝癌细胞
简称:HepG2.2.15
细胞培养条件:MEM+10% FBS+0.4mg/ml G418
生长特性:□ 贴壁 □悬浮 □半悬浮半贴壁
形态:上皮细胞样
来源:国内
是否通过STR鉴定:□是
背景资料:HepG2.2.15是抗HBV新药开发的一个良好的体外研究工具。该细胞株是用2个头尾相连的HBV-DNA全基因的重组质粒转染受体细胞HepG2而成,可在体外无性繁殖,能够长期稳定的向培养上清中分泌HBsAg, HBeAg和完整的Dane颗粒,而且还能产生大量的复制中间体,是体外筛选抗HBV药物的良好模型。
本产品仅供科研!
HepG2.2.15表达HBV病毒的人肝癌细胞使用方法:
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出15ml离心管,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后离心换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
待细胞达到一定密度(不超过1x10^6/ml)可按照以下方法换液培养或传代。
方法①:收集细胞,1000rpm离心5min,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法②:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:
1)将细胞悬液转移至15ml离心管中,1000rpm离心5min;
2)用适量的冻存液(FBS:DMSO=9 :1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
3)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。使用程序降温盒可直接放入-80℃。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含10ml完全培养基的15ml离心管中, 1000rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。
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文献和实验紧跟诺贝尔奖热点:锐博生物解析囊泡“exosome”重大发现
的LSECs细胞培养上清exosome中表达量上调。研究者将exosome中发现的这11个mRNA的表达载体和3个miRNA的模拟物分别转染到共表达HBV(乙型肝炎病毒)的HepG2细胞,结果发现HBV的DNA及RNA表达量都有所降低,从而揭示了exosome介导细胞间抗病毒作用的传递是一个非常重要的机制。 (Li J, et al. Nat Immunol. 2013)
淋巴细胞?)增殖?呈剂量依赖性反应 实施例53说明--合成疫苗可诱导肝炎病人(急、慢)的T淋巴细胞向Th1、Th2型转化,以Th1型转化最为明显 实施例54说明--合成疫苗能够诱导T淋巴细胞特异性杀伤HepG2.2.15、肽预包被的T2、E6细胞,急肝恢复期病人溶破率可达68.6%,慢性肝炎患者可达42.6% 实施例55说明--同实施例46 实施例56说明--合成疫苗在HBV-DNA转基因活鼠体内可诱发T淋巴细胞的Th1型转化 实施例57说明--合成疫苗可在转基因活鼠内诱导CTL
复制,但不能阻止病毒感染和 cccDNA 合成。此外,体内移植表明,HepaRG 细胞对裸鼠未显示明显的致瘤性。移植到 Alb-uPA/SCID 小鼠体内,仍然保持了分化功能,并具有成熟肝细胞的生物学特性。综上所述,HepaRG 是具有独特生物学特性的人肝细胞株。不但能表达正常肝细胞相关的 I 相和 II 相药代酶,在体外研究药物代谢和毒性机制中发挥作用,而且还能感染 HBV,可用于体外肝炎病毒分子机制的研究,很有希望成为原代人肝细胞的替代物。同时,HepaRG 细胞相比原代人肝细胞,还具有异于后者的优势
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