真菌膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)北京品牌

特别提示：包括真菌膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：真菌膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)
英文名称：Fungal membrane protein extraction kit (2D electrophoresis)
产品货号：HR0189
产品规格：50T|100T

膜蛋白承担各种生物功能，扮演重要角色。膜蛋白样品的制备需要充分考虑到与下游的胶分析及质谱分析等应用配套，因此膜蛋白样本制备成为一个难以逾越的挑战。
真菌膜蛋白提取试剂盒(二维电泳用)是一种基于化学方法的高产膜蛋白提取试剂盒。适用于从各种除大型真菌(蕈菌)类以外的其他真菌类样本中提取总蛋白。包括各种丝状真菌(霉菌)、酵母样本。试剂盒组分针对真菌厚细胞壁样本进行优化，提取过程简单方便，可用于纯化膜蛋白的粗品制备及膜蛋白制备。
该试剂盒含有蛋白酶抑制剂混合物和磷酸酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高质量的蛋白提供了保证。
本试剂盒提取的蛋白用于双向电泳。如需要用于报告基因检测、SDS-PAGE电泳检测、Western blotting、凝胶阻滞实验、免疫共沉淀、酶活分析等下游实验的试剂盒，请联系我公司，选用其它产品号的产品。
如需要用于大型真菌(蕈菌)、酵母的蛋白提取，请选用我公司其他货号的试剂盒。

储存条件：蛋白提取液2-8℃保存；蛋白酶抑制剂-20℃保存。
试剂C低温储存可能会有沉淀析出，水浴加热溶解后混匀即可。
有效期：一年。

※ ※ ※ 使用前请仔细阅读产品说明书 ※ ※ ※
使用限制：本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
产品更新：我公司会更新或升级产品，以优化和增强其使用性能，产品说明书会进行相应的版本更新。使用产品时，请参照随产品附带的说明书，不要参照网上下载的说明书，可能是不同的版本。需要zuì新电子版说明书时可以在收到产品后发邮件索取。
使用安全：使用时需要合适的实验室外套，一次性手套。避免皮肤或粘膜与试剂接触。如果试剂不小心接触皮肤或眼睛，应立即用水冲洗。

注意事项：
1．正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得zuì佳实验效果。
2．螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
3．禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
4．样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5．zuì好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
6．实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

产品特点：
1．使用方便。
2．含蛋白稳定剂，提取的蛋白稳定。
3．紫外检测蛋白浓度时，背景干扰低。
4．蛋白酶抑制剂抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制剂配方优化。蛋白酶抑制剂混合物包含7种独立的蛋白酶抑制剂；每一种抑制剂可特异性抑制某一种或几种蛋白酶活性。该混合物优化的组成使其可以抑制几乎所有重要的蛋白酶活性，包括丝氨酸蛋白酶、半胱氨酸酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
试剂盒以外自备试剂耗材和仪器：
● PBS ● 吸头、离心管 ● 移液器 ●冰盒 ●离心机 ● 涡旋振荡器 ●冰箱

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
●蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
●可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。

1．试剂准备：
每500μl膜提取液A中加入2μl蛋白酶抑制剂混合物，充分混匀后置冰上备用。
【注】：
● 根据需要处理的样品数量准备蛋白提取液，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
● 加过蛋白酶抑制剂的提取液一周内未使用完，再次使用前需要再次加入蛋白酶抑制剂。
2．取50-100mg样本，置于研钵中用液氮研磨。
【注】：
● 样本数量根据实验情况调整，每次的裂解液用量并不是一定的，请根据实际情况调整。
● 没有液氮研磨条件也可以直接加入冷的提取液A在冰上研磨处理。
● 如果组织样品很细小，可以剪碎后直接加入提取液2-8℃振荡。
● 液氮研磨的方法，具体方法可以联系本公司bestbio@163.com 索取详细资料。
3．加入500μl提取液A，移入一个干净离心管中在2-8℃振荡1-2小时。
【注】：
● 如果没有2-8℃持续振荡条件，也可直接置2-8℃冰箱静置1-2小时，中间每隔10分钟涡旋振荡混匀即可。
4．将提取液在2-8℃条件下12000g离心5分钟，取上清。
5．在上清中加入5μl提取液B，充分混匀。
6．在37℃水浴10分钟。
7．在37℃ 1000g离心3分钟。
【注】：
● 此步骤必须37℃条件下离心。
● 如果离心机不可控温，可以不离心，延长上一步骤水浴时间，至溶液分层清晰即可。或者在室温条件下离心，缩短离心时间至1分钟。
8．此时液体分为2层，小心移除上层部分，吸取下层管底部大约30-50μl液体。
【注】：
● 下层为粘稠状液体。
9．用50-150μl冷的膜蛋白溶解液C溶解下层溶液，即得膜蛋白样品。
10．将上述蛋白提取物定量后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题分析：
●蛋白浓度低？
膜蛋白丰度较低，需要尽可能加大细胞上样量。处理部分细胞样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。zuì好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。
●用什么方法定量蛋白？
建议用BCA 法。不适合用Bradford 法，因为试剂A中含有干扰Bradford 法的组份，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford 法定量。
● 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组份，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。

我公司销售的真菌膜蛋白提取试剂盒(2D电泳用)北京品牌，质量上佳，价格普惠，欢迎广大新老客户踊跃订购。