兔抗人IgM免疫血清北京厂家

免疫组化技术实用案例课程：第一期

案例一：DAB染色后切片着色一片黄/背景深 背景：奥运会期间我们课题组研究生都在实验室做实验，许多从北京购买的试剂买不到，对我们的许多实验产生了很大的影响。 我以前一直用中杉金桥的Sp三步法染色试剂盒，效果不错，在奥运会期间我准备做同批实验分不同批次酶免疫组化实验，第一批组化实验结果很好，抗体浓度感觉比较合适（Santa Cruz公司1：200），等做第二批时发现封闭血清不够了，为了保证实验顺利进行，我又从福州迈新顶了一个SP试剂盒，同时抗体稀释液也不够了，我又重新从博士

石蜡切片免疫组织化学染色

5分钟，95%、90%、80%和70%乙醇中分别浸泡2分钟，PBS漂洗3次，每次3分钟，置蒸馏水中待用。 3．抗原修复4．细胞膜打孔 切片置于0.1%~0.3%TritonX-100中，室温浸泡25分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。TritonX-100为去污剂，其脂溶性可使细胞膜穿孔，增加细胞膜对抗体的渗透性。检测细胞膜抗原时可免去此步骤。 5．灭活内源性酶及封闭内源性生物素6．非免疫血清封闭 抗体能被组织切片中富有电荷的胶原和结缔组织成分吸附。从而导致背景着色，为了防止这种现象

一步步完成石蜡切片IHC实验流程

，室温浸泡25分钟，PBS冲洗3次，每次5分钟。TritonX-100为去污剂，其脂溶性可使细胞膜穿孔，增加细胞膜对抗体的渗透性。检测细胞膜抗原时可免去此步骤。 5.灭活内源性酶及封闭内源性生物素 6.非免疫血清封闭 抗体能被组织切片中富有电荷的胶原和结缔组织成分吸附。从而导致背景着色，为了防止这种现象发生，最好在特异性抗体处理切片之前，选择与二抗种属相同的非免疫血清封闭电荷，阻止一抗与之结合，抑制非特异性背景着色。常用方法是用2%～10%羊血清或2%～5%牛血