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北京百奥莱博科技有限公司
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100ml/500ml
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产品名称:无菌脱纤维裂解小牛血
产品货号:E0601
产品规格:100ml/500ml
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文献和实验2. 0.5%SRBC悬液:将脱纤维的绵羊静脉血用Hank's液洗3 次,再用Hank's液配制为含压积SRBC为0.5%的悬液(约含SRBC 8×10 7 /m1)。 3. 经SRBC 吸收的灭活的新生小牛血清(NBS),取无菌NBS 置56℃水浴经30分钟灭活,取已灭活的NBS 2 体积,加入经洗涤后的压积SRBC l 体积,混匀后置37℃温箱30 分钟,离心沉淀,吸取上层血清即成。 4. Hank's 液:pH7.4 实验设备 1. 血球
,经Ficoll- Hypaque密度梯度离心后,即可将二者分开,然后裂解E-花环中的SRBC,即可获得纯T细胞,而B细胞可直接取自分层液的界面。近年来,用2-氨乙基异硫溴化物(AET)处理SRBC后,可增加E-花环形成效果与稳定性,从而提高T细胞的分离效率。 【试剂及配制】 (1) AET溶液:称取AET粉剂402mg,溶于10ml去离子水中,用4mol/L NaOH溶液约9~10滴,调至pH9.0,用0.2μm滤膜过滤除菌。用前临时配制。 (2) 分离单个核细胞所需试剂
后应立即少量分装于无菌试管中, 保存于4°C, 避免反复冷冻解冻造成DMSO 之裂解而释出有害物质, 并可减少污染之机会。若要过滤DMSO, 则须使用耐DMSO 之Nylon 材质滤膜。 15. 冷冻保存细胞之方法? 冷冻保存方法一: 冷冻管置于4℃ 30~60 分钟→ (-20 ℃30 分钟*) → -80 ℃16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 ℃ 至-80 ℃ 以下
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