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U514-001
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文献和实验BCA 蛋白定量法是实验室常用的蛋白质定量方法。Invent 所有蛋白提取试剂盒提取的蛋白均可使用 BCA 法进行定量!那么今天小编就手把手的教大家该如何用 BCA 来定量!BCA 法原理碱性条件下,蛋白将 Cu2+还原为 Cu+,Cu+与 BCA 试剂相互作用形成紫色的络合物,该水溶性的复合物在 562nm 处显示强烈的吸光性,吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系,因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。实验操作具体步骤1. 梯度稀释牛血清白蛋白(BSA)标准品(具体操作按试剂盒中说明
结合。为防止蛋白质与胶体金的聚合与沉淀,常用牛血清白蛋白,卵白蛋白,聚乙二醇或明胶作稳定剂。用Sephacryb S—400 (丙烯葡聚糖S—400 )层析分离纯化胶体金蛋白标记物只适用于以BSA作稳定剂者。一、待标记蛋白质的准备(1)透析除盐:蛋白质溶液内应除去多余的电解质,不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位,影响蛋白质的吸附,因此,标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水(0.005mol/L NaCl , pH7.0)透析。(2)去除蛋白质中的
产品。 诊断级BSA 诊断级牛血清白蛋白粉末是专门用于减少可能会产生背景干扰以及细胞培养体系抑制等因素,不含蛋白酶、生物负载以及IgG,具有很低活性的内毒素 (低于3.0 EU/mg)。可用于蛋白标准品、稀释剂、偶联物或者酶稳定剂,也可以应用于高灵敏度的免疫分析实验、细胞培养以及杂交实验等。如EquiTech- Bio的BAH68系列产品。 (责任编辑:大汉昆仑王)
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