MCF7 人乳腺癌细胞

这些细胞适合作为转染宿主。

insulin-like growth factor binding proteins (IGFBP) BP-2; BP-4; BP-5

The MCF7 line retains several characteristics of differentiated mammary epithelium including ability to process estradiol via cytoplasmic estrogen receptors and the capability of forming domes. The cells express the WNT7B oncogene.

Ref

肿瘤坏死因子α（TNFα）抑制MCF7细胞的生长。

可以通过用抗雌激素处理来调节IGFBP的分泌。

本协议中使用的容量适用于75 cm 2烧瓶; 按比例减少或增加其他大小的培养容器的解离培养基的量。康宁® T-75烧瓶（目录号＃430641）被推荐用于传代培养此产品。

注意：如果存在浮动细胞，建议在前两（2）个亚文化中转移它们，如下所述。没有必要转移浮动细胞用于后续的传代培养。

1. 将培养基移至离心管中。
2. 用0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53mM EDTA溶液短暂冲洗细胞层以除去含有胰蛋白酶抑制剂的所有痕量血清。
3. 向烧瓶中加入2.0至3.0mL胰蛋白酶-EDTA溶液，并在倒置显微镜下观察细胞直至细胞层分散（通常在5至15分钟内）。
   注意：为了避免结块，在等待细胞分离时，不要通过敲击或摇动烧瓶来搅动细胞。难以分离的细胞可置于37℃以促进分散。
4. 加入6.0至8.0mL完全生长培养基，轻轻吹打吸出细胞。
5. 用来自步骤1的培养基和细胞将细胞悬浮液转移到离心管中，并以约125×g离心5到10分钟。丢弃上清液。
6. 将细胞沉淀重悬于新鲜生长培养基中。将适当等份的细胞悬浮液加入新培养容器中。
7. 在37°C孵育培养物。

亚培养比：建议传代培养比为1：3至1：6

中等更新：每周2至3次

冷冻培养基：补充有5％（v / v）DMSO的完全生长培养基

储存温度：液氮气相

气氛：空气，95％; 二氧化碳（CO 2），5％

温度： 37°C