阿须贝氏（Ashby）培养基

稀释培养测数法（MPN）

次数可根据需要和条件而定，一般2-5个重复，个别也有采用2个重复的，但重复次数越多，误差就会越小，相对地说结果就会越正确。不同的重复次数应按其相应的最大或然数表计算结果。若要求出土样中每克干土所含的活菌数，则要将前述两例中所得的每毫升菌数除以干土在土样中所占的质量分数（烘干后的土样质量/原始土样的质量）。 计算式为： 三、实验器材 1. 土壤样品：肥沃菜园土 2. 培养基：阿须贝（Ashby）无氮培养液（附录三、15）22管（每管装5ml，加1cm×4.5cm滤纸l条） 3. 器材：90ml无菌

支原体污染的特点及检验（1）

2、支原体污染时，没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化　　3、过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式　　4、细胞流通间缺乏品管，造成实验室间的相互污染　　5、研究或操作人员忽略污染问题 而支原体污染了来源:　　1、已受污染的细胞　　2、操作人员的疏失　　3、已受污染的培养基、血清　　4、操作环境不良、实验器具不洁等 由于支原体为人体口腔中之正常菌丛，实验室之操作人员的污染亦可能为污染源，须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时，最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃，以免污染其它洁净的细胞

细胞培养常见问题与分析

1. 冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后， 须立即放入37 ℃水槽中快速解冻， 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化， 并注意水面不可超过冷冻管盖沿， 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时， 必须注意安全， 预防冷冻管之爆裂。 2. 细胞冷冻管解冻培养时， 是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外， 绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞）， 在解冻之后， 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中， 待隔天再置换新鲜培养基以去除