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北京索莱宝科技有限公司
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250g
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文献和实验+ 2,4-D 2.5 mg/L + proline 500 mg/l + glutamine 500 mg/l + CH 300 mg/l + 麦芽糖/ 蔗糖 30g/l + Gelrite 2.6 mg/l pH 5.8 继代培养基 同诱导培养基,但是2,4-D改为 2.0mg/L 共培养(固体)培养基 MS(籼稻)/N6(粳稻)大量 + MS-Fe盐 + B5微量 + B5有机 + 2,4-D 2.0mg/L + CH 500mg/l + 肌醇2000 mg/L + AS 100μM
可在含 8~15% 甘油培养液中-20 ℃ 或-70 ℃ 保存。也可在半固体 LB 琼脂培养基中穿刺保存。 思 考 题1. 描述体外 DNA 重组的基本过程。2. 名词解释:质粒、限制性核酸内切酶、感受态细胞、转化、α互补。3. 限制性核酸内切酶切割 DNA 片段后的连接需要考虑哪些问题。4. 构建一个克隆载体的必要条件有哪些。
[实验步骤] (一) 提取质粒 1.将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到试管中,接入含质粒的大肠杆菌,37℃振荡培养过夜。 2.取1.5ml培养物倒入微量离心管中,4000rpm,离心2min。 3.吸去培养液,使细胞沉淀尽可能干燥。 4.将细菌沉淀悬浮于100μl溶液Ⅰ中,充分混匀,室温放置10 min。 5.加200μl溶液Ⅱ(新鲜配制),混匀内容物,将离心管放冰上5 min。 6.加入150μl
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