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文献和实验可。 [实验药品] ①MnSO4溶液:称取480 g硫酸锰(MnSO 4 ·4H 2 O或364 gMnSO 4 ·H 2 O)溶于水,用水稀释至1000 ml。 ②碱性碘化钾溶液: 称取500 g分析纯NaOH溶解于300~400 ml水中,另取150 gKI溶于200 ml水中,待NaOH溶液冷却后,将两溶液混合,用水稀释至1000 ml。此溶液不能有碳酸盐存在,如果有沉淀需先过滤。贮于棕色瓶中
,培养皿(120mm),脱脂棉,棕色试剂瓶,吸液管,吸耳球,玻璃纸,坐标纸。 2.试剂: 重蒸水,丙烯酰胺(重结晶),甲叉双丙烯酰胺(重结晶),过硫酸铵,TEMED(四甲基乙二胺),载体两性电解质(pH3.5~10),考马氏亮蓝R250,液体石腊,乙醇(95%),硅油,磺基水杨酸,三氯乙酸,甲醇,乙酸(36%),已知pI蛋白质样品和标准等电聚焦样品(市售),磷酸,氢氧化钠。 3.溶液配制: (1)单体贮液:丙烯酰胺2.91g,甲叉双丙烯酰胺0.9g,重蒸水溶解,定容到100ml,过滤
质亚基带上大量负电荷,掩盖了蛋白质各种亚基间原有的电荷差异。亚基的构象均呈长椭圆棒状,各种蛋白质亚基-SDS复合物表现出相等的电荷密度。在电场中其迁移速率仅与亚基分子质量有关,因此,SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳可以进行蛋白质亚基分离,并用来测量蛋白质亚基的分子质量。三、仪器、试剂和材料1.仪器( 1)稳压稳流电泳仪( 2)垂直板电泳槽( 3)微量注射器( 4)烧杯50ml X2( 5)白瓷盘( 6)脱色摇床( 7)吸管0.5ml X 2 ,5mlx2,10mlx3( 8)真空泵( 9)台式高速
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