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文献和实验免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。7.同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)悬浮细胞:1)收集对数期细胞,调节细胞悬液浓度1×106/ml,按次序将①补足的1640(无血清)培养基40ul ;②加Actinomycin D(有毒性)10ul用培养液稀释 lg/ml,需预试寻找最佳稀释度,1:10-1:20);③需检测物10ul;④细胞悬液50ul(即5×104cell/孔),共100ul加入到96孔板(边缘孔用无菌水填充
,可以吸水,最主要的是防止再次污染!不过不包的话和没有太大影响,灭菌完成后水多的话可以在烘箱里放时间长些! 提取rna 时移液器要不要灭菌? 枪一般不需要灭菌!如果实在需要的话,就放在超净工作台用紫外光照射半小时! RNA提取 时枪头灭菌? 用普通的EP管和枪头,在高压灭菌前,还要用DEPC水浸泡过夜来去除RNase,隔天去除DEPC后将放入枪头盒中湿热灭菌。121度,15-20分。为了避免水蒸气困扰,可以在枪头盒外包上报纸,或者灭菌后置于温箱中干燥
管”。不需要,国外的枪头,离心管散装的,装好在枪头盒里面 ,直接可以用,不需要高压灭菌。国产的我用得不多, 反正我买过浙江产的2分钱一个的离心管,照样不需要DEPC处理,不需要高压,打开了,直接用。总之做不出来, 首先千万不要找枪头,离心管是国产质量不好的原因。道理很简单,高温高压生产线的塑料管子早就经历了几百度高温的融浆状态,早就RNA酶灭活干净了。退一万步,即使污染了RNA酶,至少和裂解液接触的枪头离心管子全部不用处理吧?。举个例子,如果用一个污染了RNA酶的枪头去吸取裂解液,会发生下面哪种情况
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