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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
140
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
操作人含MOCO硫化酶羧基端域蛋白1(MOSC1)ELISA试剂盒注意事项说明:
1. 实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2. 酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3. 建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
4. 为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
实验的基本操作流程
A 包被ELISA板子或使用商品化ELISA板
B 让标本中的抗原/抗体与固相载体上的抗体/抗原结合,形成固相复合物。
C 根据颜色反应的程度进行抗原/抗体的定性或定量。
人含MOCO硫化酶羧基端域蛋白1(MOSC1)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测
如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应;
如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存;
冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测;
反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
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文献和实验一、ELISA试剂盒的组成 完整的ELISA试剂盒包含以下各组分: (1)已包被抗原或抗体的固相载体(免疫吸附剂); (2)酶标记的抗原或抗体(结合物); (3)酶的底物; (4) 阴性对照品和阳性对照品(定性测定中),参考标准品和控制血清(定量测定中); (5)结合物及标本的稀释液; (6)洗涤液,在板式ELISA中,常用的稀释液为含0.05%吐温20磷酸缓冲盐水; (7)酶反应终止
品,同时也作为判断结果的对照,因此对照品,特别是阳性对照品的基本组成应尽量与检测标本的组成相一致。以人血清为标本的测定,对照品最好也为人血清,因为正常人血清在各种ELISA模式中可产生不同程度的本底。由于大量正常人血甭较难得到,国外试剂盒中的对照品多以复钙人血浆(recalcified human plasma)为原料,即在血浆中加入钙离子,使其中的纤维蛋白质凝固,除去凝块后所得的液体,其组成与血清相似。阴性对照品须先行检测,确定其中不含待测物质。例如HBsAg检测的阴性对照品中不可含HBsAg,最好抗HBs
值比较,可对标本中受检物质的量有一个粗略的估计。国外检测 HBsAg的ELISA试剂盒检测敏感度约为0.5ng/ml,阳性对照品中含量约为10ng/ml。在对照 品中一般加入抗生素和防腐剂,以利保存。 3.7 参考标准品 定量测定的ELISA试剂盒(例如甲胎蛋白质癌胚抗原测定等)应含有制作标准曲线用 的参考标准品,应包括覆盖可检测范围的4-5个浓度,一般均配入含蛋白保护剂及防腐剂 的缓冲液中。 上一篇:ELISA的原理和类型
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