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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
128
- 适应物种:
人/动物/植物等
- 应用:
用于科研试剂实验
- 检测方法:
elisa法
- 检测范围:
科研试剂
- 供应商:
上海机纯实业有限公司
- 规格:
48T/96T
操作人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒血注意事项说明:
1. 实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。
2. 酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。
3. 建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。
4. 为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。
实验的基本操作流程
A 包被ELISA板子或使用商品化ELISA板
B 让标本中的抗原/抗体与固相载体上的抗体/抗原结合,形成固相复合物。
C 根据颜色反应的程度进行抗原/抗体的定性或定量。
人α半乳糖基抗体(Gal)ELISA试剂盒血清标本宜在新鲜时检测
如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应;
如在冰箱中保存过久,其中的可发生聚合,在间接法ELISA中可使本底加深。一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃,超过一周测定的需低温冰存;
冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀宜轻缓,避免气泡,可上下颠倒混和,不要在混匀器上强烈振荡。混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测;
反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。
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文献和实验双抗体夹心ELISA法检测待测样品sTNF- α 含量 【基本原理】 选用两株针对TNF-α分子不同位点的单克隆抗体,即McAb1 (包被抗体)与McAb2 (酶标抗体)。先用McAb1 包被固相载体,使待测sTNF-α与之特异性结合,然后再加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的McAb2 ,则形成McAb1 -sTNF-α -HRP标记McAb2 复合物,再加入HRP底物,则酶催化底物显色,测定样品与标准品光密度值(即OD值),绘制标准曲线,即可从标准曲线中
实验试剂 1. 包被抗体McAb1 :使用时用包被液作适当稀释(如1:100)。 2. 酶标抗体McAb2 :以辣根过氧化物酶(HRP)标记。使用时用稀释液作适当稀释,其稀释度根据预试验结果而定。 3. rhuTNF-α标准品:已知含量的rhuTNF-(10ng/ml),使用时用稀释液作倍比稀释成7个浓度:5 ng/ml,2.5 ng/ml,1.25 ng/ml,625pg/ml,312 pg/ml,156 pg/ml
特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。 但是这种特异性也不是绝对的。假使两种化合物有着部分相同的结构,在抗原抗体反应中可出现交叉反应。例如:绒毛膜促性腺激素(hCG)和黄体生成激素(LH)均由 α 和 β 两个亚单位组成,其结构的不同处在 β 亚单位,而两者的 α 亚单位是同类的。用 hCG 免疫动物所得的抗血清中含有抗 α-hCG 和抗 β-hCG两种抗体,抗 α-hCG 抗体将与LH中的 α 酶位发生交叉反应。在临床检验中,如用抗 hCG
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